放射性碘标记_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

在RIA中,标记抗原质量的优劣,直接影响测定结果,必须制备比放射性强、纯度高的标记抗原,并保持免疫活性不受丧失。

http://qihuangzhishu.com/969/222.htm

免疫电镜胶体金标记法_《实用免疫细胞与核酸》在线阅读_【中医宝典】

...标法是Faulk和Taylor(1971)提出的,并首先用于免疫电镜。它是利用胶体金在碱性环境中带有负电的性质,使其与抗体相吸附,从而将抗体标记。当用金标记的抗体与抗原反应时,在光镜水平胶金液呈现鲜艳的樱红色,不需加外进行染色。在电镜水平,金颗粒具有很高的电子密度,清晰可辨。因此,免疫电镜胶体金标记法近年来被成功地应用于生物学的各个方面,并取得了要喜的进展,...

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免疫细胞化学的有关技术概述_《实用免疫细胞与核酸》_【中医宝典大全】

根据标记物的不同,免疫细胞化学技术可分为免疫荧光细胞化学技术,免疫酶细胞化学技术,免疫铁蛋白技术,免疫金-银细胞化学技术,亲和免疫细胞化学技术,免疫电子显微镜技术等。近些年来,核酸分子原位杂交技术采用生物素、地高辛等非放射性物质标记探针,和免疫细胞化学技术密切结合,发展为杂交免疫细胞化学技术。不同的免疫细胞化学技术,各具有独特的试剂和方法,但其基本技术方法是...

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末端标记法_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

在大肠杆菌T 4 噬菌体多聚核苷酸激酶(T 4 PNK)的催化下,将γ- 32 P-ATP上的磷酸连接到寡核苷酸的5’末端上。要求标记的寡核苷酸5’端必须带羟基。反应式为: 此法适用于标记合成的寡核苷酸探针。如将底物改为Bio –11 –dUTP,也可以在3’端标记上一个生物素。 寡核苷酸 35 S的3’—末端标记法:将下列液体依次加入Eppendorf管中...

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临床生物化学/核酸杂交技术

检验方法建立的基本要素是特异性和灵敏度,在复杂的物体中,使无法感觉的特定物质进入人类的观察范围。 核酸 杂交检测技术就是利用核酸 碱基 严格配对的特异性,核酸 标记物 的灵敏度而建立的检测核酸结构与功能的方法。该法建立以来已有二十年,目前研究实验室用得多,临床实验室用得较少,除成本高外,关键是操作复杂,重复性差,仅能半定量。成本高可随经济发展而缓和,但其它缺...

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胶体金标记物的制备_《实用免疫细胞与核酸》_【中医宝典大全】

胶体金标记蛋白质的原理,一般认为是由于pH值等于或稍偏碱于蛋白质等电点时,蛋白质呈电中性,此时蛋白质分子与胶体金颗粒相互间的静电作用较小,但蛋白质分子的表面张力却最大,处于一种微弱的水化状态,较易吸附于金颗粒的表面,由于蛋白质分子牢固地结合在金颗粒的表面,形成一个蛋白层,阻止了胶体金颗粒的相互接触,而使胶体金处于稳定状态,如果=低于蛋白质的等电点时,蛋白质带...

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中药材真伪鉴别新方法——DNA分子标记鉴别技术_【中医宝典】

...别方法已无法满足鉴别的需要。随着各种先进仪器以及分子生物学的发展,各种新的鉴别方法亦纷纷推出,如红外光谱鉴别、化学指纹图谱鉴别以及DNA分子标记鉴别等,中药材鉴别领域显示出了蓬勃的生机。 近年来,以PCR为基础的DNA分子标记鉴别技术在中药材真伪鉴别中发挥了重要的作用,同时,在多基源品种的鉴别及道地药材鉴别中也崭露头角,显示出了巨大的前景。以 人参 、美国西...

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多肽物质分子量检测技术_【中医宝典】

随着分子生物学和生物技术的飞速发展,具有高生物活性的多肽类化合物的分离、纯化和分析已显得尤为突出。许多分离、纯化和分析技术都是以分子量的大小为手段的,现将我们采用的几种主要的技术介绍如下:凝胶过滤测相对分子量该技术即凝胶过滤层析,也称分子排阻层析或凝胶渗透。利用凝胶过滤可以把蛋白质多肽类混合物按分子量的大小分离出来。当不同分子大小的蛋白质多肽类混合物流经凝胶...

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辣根过氧化物酶标记核酸探针法_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

此法标记原理如下图所示: 标记的HRP部分催化底物化学发光反应:氨基苯二甲酰肼 氨基苯二甲酸 +N 2 +光→X-光片上感光10~20min显定影。 光亮子在酚、萘及胺类等增强剂促进下,而使光亮增强。 这种方法就是利用特殊的酶底物,氧化后把产生的能量转变为光能放出,称为化学发光。杂交后与探针结合的酶催化相应的发光剂,经增强剂将光能放大,在X光片上显示杂交信号...

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蓝色荧光素标记抗体方法_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

Kbaffan等(1986)首先创立了蓝色荧光素标记和染色技术,可进行双标记或多标记。 (1)取7-氨基-4-甲基香豆素(7-amino-4-methyl coumarin, AMC)260μg溶于二甲亚砜25μl中。 (2)将上液加入10ml IgG的 巴比妥缓冲液(0.5mol/L,pH8.5,内含50~100mg IgG)中,室温反应2h,过Sepha...

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