...类型检测可用核酸测序,人工合成寡核苷酸探针作产前诊断。前者多用于研究,后者可应用于临床。现可利用PCR法扩增突变区域,再行测序或杂交分析,大大提高了灵敏度和特异性,可省去目的基因的克隆,方法也得到一定的简化。⒋密码子缺失和插入它与移码突变不同...
...根据标记物的不同,免疫细胞化学技术可分为免疫荧光细胞化学技术,免疫酶细胞化学技术,免疫铁蛋白技术,免疫金-银细胞化学技术,亲和免疫细胞化学技术,免疫电子显微镜技术等。近些年来,核酸分子原位杂交技术采用生物素、地高辛等非放射性物质标记探针,...
...核酸是由核苷酸聚合而成的高分子化合物,是所有生物遗传信息的携带者。根据核苷酸分子中戊糖的类型,将核酸分为脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)两大类。核苷酸由磷酸基、戊糖和含氮碱基组成,碱基包括嘌呤和嘧啶两大类。DNA一般含A、C、G...
...由此可见,对不同类型的组织DNA提取,蛋白酶K的孵育时间可作适当调整,以求最大量地获取大分子DNA。此外,对于Dubeau等提出的DNA提取过程中分次消化步骤的必要性,也有人提出异议。因为低、中分子量的核酸存在对限制性内切酶的消化和杂交...
...变性处理,点到膜上,使用轮状病毒体外转录的放射标记探针做斑点杂交,敏感性高于ELISA。肠道病毒也可用互补的DNA探针做斑点杂交。目前核酸分子杂交不但用来检测急性病人标本中的病毒DNA,也用于检测不易分离培养的慢性感染、潜伏感染、整合感染...
...两个不同遗传类型的水稻品种杂交产生的杂交种子播种后长成的水稻。根系发达,茎秆粗壮,生长旺盛,穗大粒多,具有明显的杂种优势。但杂交种子只能利用第一代,第二代开始产量下降,因此需要年年制种。...
...1.缺口平移 该技术由Kelly等于1970年创立。其原理是首先用DNA酶在双链DNA探针分子的一条链上制造一些缺口(nick ),缺口处会形成3’—羟基末端,这时再在大肠杆菌DNA聚合酶I的催化下将核苷酸残基加在3’-羟基上,同时,根据...
...原位杂交术(in situ hybridization)是一种核酸分子杂交技术,它是通过检测细胞内mRNA和DNA序列片段,原位研究细胞合成某种多肽或蛋白质的基图1-11 大鼠肝大部切除后再生过程中增殖期肝细胞摄取3H标记的胸腺嘧啶核苷...
...核酸杂交与探针技术,聚合酶链反应(polymerasechain reaction,PCR)技术等。3.分子杂交:(hybridization)不同来源的核酸变性后,合并在一处进行复性,这时,只要这些核酸分子的核苷酸序列含有可以形成碱基互补...
...基因设计并合成一对特异PNA探针,经生物素标记后,分别与链霉亲和素包被的磁珠或Cy5纳米颗粒结合;探针与待测鼠疫菌的DNA杂交后,磁性纳米颗粒牢固连接靶核酸-探针结合体,用磁分离架收集后即可得纯化的特异核酸分子,经变性处理后对Cy5荧光纳米...
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