...(diastase)等。这种广泛的去蛋白作用无疑可增强组织的通透性和核酸探针的穿透性,提高杂交信号,但同时也会减低RNA的保存最和影响组织结构的形态,因此,在用量及孵育时间上应慎为掌握。蛋白酶K(ProteinaseK)的消化作用在ISHH...
...核酸酶可分为两类:核酸外切酶(exonuclease)是从核酸的一端开始,一个接一个把核苷酸水解下来;核酸内切酶(endonuclease)则从核酸链中间水解3’,5’磷酸二酯键,将核酸链切断。很多细菌和细胞中都能识别外来的核酸并将其分解...
...monophosphate),化学结构如下。环化核苷酸在细胞内代谢的调节和跨细胞膜信号中起着十分重要的作用。表15-1 核苷酸及相应的核苷、碱基名称中英文对照表核苷酸核苷碱基腺苷酸(AMP)腺苷腺嘌呤(A)adenosine ...
...介绍。一、限制性核酸内切酶的概念核酸酶可分为两类:核酸外切酶(exonuclease)是从核酸的一端开始,一个接一个把核苷酸水解下来;核酸内切酶(endonuclease)则从核酸链中间水解3’,5’磷酸二酯键,将核酸链切断。很多细菌和细胞...
...PCR-SSCP;巢式PCR(二次PCR);热启动PCR等)。RT-PCR用于RNA分析;PCR-SSCP分辨率高,可用于点突变分析;二次PCR特异性好,灵敏度高;热启动PCR可提高特异性。PCR技术原理是在了解DNA一级结构基础上设计引物(...
...末,Britten等设计了另一种分析细胞基因组的方法。该法是研究液相中DNA的复性以比较不同来源核酸的复杂度,典型的方法是:从不同生物体(细菌、酵母、鱼和哺乳动物等)内分离DNA,用水压器剪切成长约450核苷酸(nt)的片段。剪切的DNA液...
...的结构特点以及Apo(a)基因的结构特点。其他的载脂蛋白基因结构均以列表的形式介绍。...
...核酸结构的基本单位是核苷酸(nucleicacid),每个核苷酸由1个磷酸、1个五碳糖和1个碱基3部分组成。核酸有两类:一类是脱氧核糖核酸(DNA),DNA中的脱氧核糖核苷酸主要由4种碱基构成,即腺嘌呤(adenine,A)、鸟嘌呤(...
...探针可以用放射性核素标记,结合了放射性核酸探针的菌落集团可用放射性自显影(auroradiography)法指示出来,核酸探针也可以用非放射性物质标记,通常是经颜色呈现指示位置,这样就可以将含有目的序列的菌落挑选出来。三、PCR法PCR技术...
...合成。1975-1977年Sanger、Maxam和Gilbert先后发明了三种DNA序列的快速测定法;90年代全自动核酸序列测定仪的问世;1985年Cetus公司Mullis等发明的聚合酶链式反应(PCR)的特定核酸序列扩增技术,更以其...
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