...在实际工作中常采用琼脂糖凝胶电泳。一般情况下先在电泳缓冲液或凝胶中加1%溴化乙锭（EB）（每100ml加100μl），然后将已经制备好的1%～2%琼脂糖凝胶（用电泳缓冲液配制）放入电泳槽内，加入待测样品10μl，同时用分子量标准品作标记。...
...互补的寡核苷酸为引物（CP1/CP2），建立了从胃粘膜活组织标本中检测Hp感染的PCR技术。用该方法检测Hp标准菌株NCTc 11637，NCTC11848及50株从临床病人胃粘膜活组织中分离的Hp菌株均产生450bp的片段，其敏感性为...
...冰浴冷却，取40μl上清作PCR。③碱裂解法：取收集标本100μl加于含1mol/lNaCl,1mol/L NaOH和0.1%SDS的溶液中煮沸1.5min,用400μl（0.5mol/L）Tris-HCl(pH8.0)中和。用相同体积的...
...或短的RNA和DNA探针可选用此法标记，寡核苷酸探针一般多用这种标记。T4多核苷酸激酶（polynucleotide kinase, PNK）是由T4噬菌体感染的大肠杆菌中提取的，此酶能催化ATP的γ-磷酸转移至DNA或RNA的5’－OH...
...PCR循环中选用的变性温度，不宜高于95℃。Taq酶现已可用基因重组的方法生产，商品名为Ampli Taq（Cetus公司）。Taq酶的完整基因长2499bp，在大肠杆菌中表达生产，含832个氨基酸。在氨基酸序列上与大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ有38...
...清楚的DNA或需确定DNA带的特异性时，可用标记的公用混合探针和（或）型特异探针作Southern吸印杂交、斑点杂交验证。按照标准方法制32p ATP标记的寡核苷酸探针，需达到约107cpm/pmol特异活性。杂交液中需含有2×106-5×...
...ELISA方法具有更高的敏感性和特异性，可用来确诊其他血清试验结果，尤其是对处于界值附近的患者血清。4.2 聚合酶链反应（PCR）该技术的敏感性比寡核甙酸探针增加了100倍，可以检出至少100个Hp。目前Hp的尿素酶基因和16SrRNA基因的...
...ELISA方法具有更高的敏感性和特异性，可用来确诊其他血清试验结果，尤其是对处于界值附近的患者血清。4.2 聚合酶链反应（PCR）该技术的敏感性比寡核甙酸探针增加了100倍，可以检出至少100个Hp。目前Hp的尿素酶基因和16SrRNA基因的...
...得到的HLA-RFLP可以和传统方法测定的HLA特异性型别相关。80年代末发展起来的PCR（polymerase chain reaction）技术已被用于RFLP分析，即用等位特异限制酶裂解PCR扩增的片段，然后再进行分析，从而大提高了...
...，迟发型变态反应皮试阴性，有丝分裂原刺激反应低下。（2）B淋巴细胞功能失调：多克隆性高球蛋白血症，循环免疫复合物形成和自身抗体形成。（3）NK细胞活性下降（4）各种致病性感染的病原体检查如PCR。组织学证实的恶性肿瘤，如KS；（三）HIV...
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