...推出多种非放射性探针标记试剂盒,在国内也已具备生物素类标记物的生产能力,并有相应试剂出售。目前,非放射性标记物有下述几类:金属如Hg,荧光物质如FITC;半抗原如地高辛;生物素;酶类如辣根过氧化物酶(HRP)。半乳糖苷酶或碱性磷酸酶(AKP...
...为了体外研究脂蛋白的细胞代谢和脂蛋白受体活性,早在1974年Goldstein和Brown就建立了成纤维细胞125I标记LDL的配体-受体结合分析法。其基本原理是:用放射性同位素(常用125I)标记LDL后,与细胞(通常为培养的单层成...
...我们从吉林产的枸杞制药废渣中提取出粗多糖,并对其进行了组分鉴定与相关成分分析。 1 材料与仪器 材料为吉林省通榆产枸杞(系指吉林省通榆县引种的茄科植物宁夏枸Lycium barbarum L.的干燥成熟果实。以下简称吉林枸杞,经50度白酒提取...
...Ab;②标记一种抗体,就能与一种以上的相应抗原结合鉴定多种抗原或抗体;③敏感性比直接法高。缺点:①参加反应因素多,易出现非特异性反应;②实验方法复杂。(3)补体结合法:是标记补体抗体的方法,第一步是将抗体和补体加入反应体系;第二步是加入标记...
...细胞或组织内未知mRNA的检测,仍宜采用未使用过的探针杂交液为佳。与放射性标记相比,地高辛标记探针具有非放射性探针的优点,对人体无害,不受半衰期限制,探针可长期保存。与生物素标记探针相比,地高辛探针不受组织、细胞中内源性生物素的干扰,敏感性...
...包含基因组的全信息的克隆库。然后用多种其它菌种的DNA作探针来筛选,产生杂交信号的克隆被剔除,最后剩下的不与任何其它细菌杂交的克隆则可能含有该细菌特异性DNA片段。将此重组质粒标记后作探针进一步鉴定,亦可经DNA序列分析鉴定其基因来源和功能。...
...预测性诊断(表23-4)。免疫荧光(IF)法用于鉴定病毒具有快速、特异的优点,细胞内的病毒或抗原可被荧光素标记的特异性抗体着色,在荧光显微镜下可见斑点状黄绿色荧光,根据所用抗体的特异性判断为何种病毒感染。表23-4 病毒在细胞内增殖的指征病毒...
...使用,这对来之不易的抗原尤其重要;④标记简便、易防护。要准确测量B与F的放射性,必须有足够的放射性强度。所选用的标记抗原的量,在使用125I时达5000~15000cpm。(三)抗体应选择特异性高、亲和力强及滴度好的抗体,用于放射免疫测定。...
...二)超速离心和梯度密度离心法超速离心是分离亚细胞及蛋白质大分子的有效手段,往往是进一步纯化的第一次过筛。超速离心又分差速离心和梯度离心。差速离心系指低速与高速离心交替进行,用于分离大小差别较大的颗粒。梯度密度离心是一种区带分离法,通过梯度...
...载脂蛋白分离纯化后,获得了所需要的纯品,该纯品纯度及其品种可通过下述方法进行鉴定。一、免疫电泳法免疫电泳法既可用于鉴定蛋白种类,又可鉴定其纯度。制备1%的琼脂糖,以0.1mmol/L巴比妥缓冲液(0.05μ,pH8.6)为溶剂,制作一块约...
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