...或几种抗原相对应的抗体的话,则在该抗原印迹部位形成免疫复合物沉淀。在洗去未沉淀的抗原和抗体后,在膜上加标记的抗人免疫球蛋白的抗体,此抗体可以和病毒抗原与人抗体形成的免疫复合物发生反应,最后加入显色底物(如果抗人Ig是用酶标记的)或做放射自...
...相互排斥而不能互相结合。为防止蛋白质与胶体金的聚合与沉淀,常用牛血清白蛋白,卵白蛋白,聚乙二醇或明胶作稳定剂。用Sephacryb S—400 (丙烯葡聚糖S—400)层析分离纯化胶体金蛋白标记物只适用于以BSA作稳定剂者。一、待标记蛋白质的...
...由于酶标抗体存在一些缺点,例如①酶与抗体间的共价连结可损害部分抗体和酶的活性;②抗血清中的非特异性抗体被酶标记后,与组织成分结合,可致背景染色等。为此Sternberger等在酶标法的基础上,发展了非标记抗体酶法。包括酶桥法(Enzyme...
...除去未结合的抗体。 第二步,加上荧光标记的抗球蛋白抗体或抗IgG、IgM抗体。如果第一步发生了抗原抗体反应,标记的抗球蛋白抗体就会和已结合抗原的抗体进一步结合,从而可鉴定未知抗体。 阳性:重症肌无力、类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、恶性贫血、...
...标记纯化的人IgG,制成免疫用的双抗原。动物免疫。动物:体重分别为2.5kg和3.0kg的雄性家兔2只。免疫:初次免疫是将含HRP20mg,IgG5mg的双抗原加等体积的福氏不完全佐剂多点、多部位注射于每只家兔的四肢。间隔1月后用原剂量的双...
...,除去未结合的抗体。 第二步,加上荧光标记的抗球蛋白抗体或抗IgG、IgM抗体。如果第一步发生了抗原抗体反应,标记的抗球蛋白抗体就会和已结合抗原的抗体进一步结合,从而可鉴定未知抗体。 间接免疫荧光法:阴性。 阳性: Hu抗体主要见于类瘤性...
...缓冲液的配制 第八节 免疫胶体铁细胞化学 一、胶体铁的制备方法 二、抗体的标记和纯化 三、胶体铁标记抗体的鉴定 四、免疫胶体铁细胞化学染色 五、方法的应用 参考文献 第六章 亲合组织化学技术及免疫细胞化学技术的某些进展 第一节 抗生物素—...
...,除去未结合的抗体。 第二步,加上荧光标记的抗球蛋白抗体或抗IgG、IgM抗体。如果第一步发生了抗原抗体反应,标记的抗球蛋白抗体就会和已结合抗原的抗体进一步结合,从而可鉴定未知抗体。 阳性: Hu抗体主要见于类瘤性感觉神经病及类瘤性脑脊髓炎...
...FITC)标记抗体的具体步骤详见第三章 。在标记络丹明B200(lissamine rhodamin B200,RB200)时应注意:(1)PCI5极易吸收水份放出烟雾样刺激气体,RB200和丙酮混合后搅拌时也放出有毒的SO2Cl刺激性气体,故...
...,成为标记荧光免疫球蛋白,即荧光抗体。反应式如下(图3-6):一个Ig分子上最多能 标记15~20个FITC分子。图3-5 FITC的吸收光谱和发射光谱图3-6 抗体的FITC标记反应式(二)四乙基罗达明(...
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