（一）基本原理 应用DNA探针缺口翻译（nick translation）方法，通过碱基配对以一条DNA链为模板，将生物素标记的某一种脱氧三磷酸核苷酸如Bio-dUTP渗入有缺口的DNA链。将生物素标记的DNA探针与细胞或组织进行原位杂交。显示方法有二种：一种是用HRP显示，类似免疫电镜技术中采取的包埋前染色法，利用地高辛-过氧化物酶HRP显色法进行光镜水平...
一、DNA探针的应用
（一）基本原理 利用性染色体X或Y的特异性DNA探针的ISHH技术进行胎儿生前（Prenatal）性别的诊断，样品取自于羊水、绒毛或胎儿的血液。近年，科技工作者又成功地进行了胚前（pre-embry－o）或植入前（preimplantation）的ISHH诊断。所谓胚前诊断是在受精卵植入子宫内膜前的4～6细胞期，以显微操纵器（micromanipulator...
虽然一般认为DNA探针敏感度不如cRNA探针，但在病毒的检测等领域中DNA探针仍得到广泛的应用。 在原位杂交细胞化学的操作步骤方面与cRNA探针基本相同，所不同的是：（1）杂交时需先在高温80～95℃短时处理，使DNA探针及细胞内靶DNA变性，解离成单链，迅置于冰上冷却。然后置于37℃～42℃杂交过夜。（2）RNA酶的溶液的冲洗不能减低背景，因此，在操作步骤...
（一）光敏生物素标记cRNA探针的应用 以线性质粒DNA为模板合成未加标记物的cRNA探针，使其最终浓度为0.5～1.0μg/μl(500~1000ng/μl),再与等体积的光敏生物素（1μg/μl）混合。在150瓦卤素灯下，距离光源20cm处照射30min。用仲丁醇抽提游离生物素，再用丁醇沉淀回收光敏生物素cRNA探针，将其溶于适量的灭菌双蒸水，用紫外分光...
核酸 指由许多 核苷酸 聚合而成的生物大分子 化合物 ，为生命的最基本物质之一。最早由米歇尔于1868年在 脓细胞 中发现和分离出来。核酸广泛存在于所有动物、植物细胞、微生物内、生物体内核酸常与 蛋白质 结合形成核 蛋白 。不同的核酸，其 化学 组成、核苷酸排列顺序等不同。根据化学组成不同，核酸可分为 核糖核酸 ，简称RNA和 脱氧核糖核酸 ，简称DNA。D...
聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction)，简称PCR，是一种分子生物学技术，用于放大特定的DNA片段。可看作生物体外的特殊DNA复制。
聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction)，简称PCR，是一种分子生物学技术，用于放大特定的DNA片段。可看作生物体外的特殊DNA复制。
基因探针 （probe）就是一段与目的 基因 或 DNA 互补的特异 核苷酸序列 ，它可以包括整个基因，也可以仅仅是/基因的一部分；可以是DNA本身，也可以是由之 转录 而来的 RNA 。 1． 探针 的来源 DNA探针根据其来源有3种：一种来自 基因组 中有关的基因本身，称为 基因组探针 （genomic probe）；另一种是从相应的基因转录获得了mRN...
...合物（oligonucleotides），通常由40~100个氨基酸分子所组成。 寡核苷配体是美国3个不同的科研小组在1990年研究脱氧核糖核酸的酶活力时偶然发现。他们在试管中分离具有酶功能的核糖核酸时，偶然发现了一种无规则分布的8个核苷酸顺序。他们发明的“指数富集法配体进化系统（SELEX）”为一种新颖寡核苷配体生产技术，该项生产技术已获得美国专利。利用S...
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