...简称为原位杂交PCR（PCr in situ, PCRIS）。在本书二十二章 中曾介绍了PCR技术，它是一种对特定的DNA片段在体外进行快速扩增的无细胞克隆技术，基本步骤包括高温变性，低温退火适温延伸三个步骤的反复热循环，其效率可使几个拷贝...
...分子生物学是在生物化学基础上发展起来的，以研究核酸和蛋白质结构、功能等生命本质的学科，在核酸、蛋白质分子水平研究发病、诊断、治疗和预后的机制。其中基因工程（基因技术，基因重组）是目前分子生物学研究热点，这些技术可以改造或扩增基因和基因产物...
...（一）载体载体（Vector）是把外源DNA（目的基因）导入宿主细胞，使之传代、扩增、表达的工具。载体有质粒（plasmid）、噬菌体、单链丝状噬菌体和粘性末端质粒（粘粒）、病毒等。载体具有能自我复制；有可选择的，便于筛选、鉴定的遗传标记...
...D-loopregion）的“DNA”指纹图”。PCR技术由Mullis等首创（详见第二十二章 ）。它又称为DNA体外扩增技术，是用DNA聚合酶在体外扩增一段DNA顺序达百万倍以上。这样就可直接观察而不用印迹杂交法。这项技术的基本原理是，将有待扩增的DNA分子...
...人员sellers指出这种异常扩增的mitf致癌基因的确定将促进研究人员开发出更好的诊断和预测工具以及为治疗转移性黑素瘤病人（这种基因的拷贝数过多）的高专一性疗法提供了一个靶标。 由太阳曝晒导致的黑素瘤在过去的几十年迅速增加。2005年，...
...；PCR方法扩增的目的DNA片段可直接用作序列分析，较常用的通过克隆、培养扩增、纯化制备等步骤获得测序片段更为简便。3．灵敏度高PCR产物的生成是以指数方式增加的，所以欲扩增pg量级的起始物到μg水平或放大真核细胞单拷贝基因，通过PCR方法...
...功能基因被克隆和专利保护。基因组学的研究带动了生物学研究的发展和技术的进步，各种新的概念和技术不断出现，虽然理解并利用些技术需要时间和实践，但对新技术在功能基因研究中的潜力及对功能基因研究的促进速度需要足够的估计，以免在激烈的基因资源争夺中...
...进行。2．省时应用TaqDNA聚合酶时，单核苷酸掺入速率较高，75～80℃时，每个酶分子每秒钟可完成150个核苷酸的合成。PCR每一周期需数分钟，所以，一般常取用20～30个周期能使目的DNA达数到百万倍扩增的反应只要数小时即可完成。在基因...
...两条双链DNA分子。如此反复进行，每一次循环所产生的DNA均能成为下一次循环的模板，每一次循环都使两条人工合成的引物间的DNA特异区拷贝数扩增一倍，PCR产物得以2n的批数形式迅速扩增，经过25～30个循环后，理论上可使基因扩增109倍以上...
...磷酸肌酸激酶活性作出诊断等。2．酶和蛋白质的分析 基因突变引起的单基因病主要是特定的酶和蛋白质的质和量改变的结果。因此，对酶活性的改变和蛋白质含量测定是确诊某些单基因病的主要方法。随着生化检测技术的不断进步，还可对酶和蛋白质的结构变异型（...
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