原位杂交信号显示_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

目前应用原位杂交方法中,信号的显示主要有放射自显影,酶底物及免疫金银等方法,在此归纳有关的主要试剂。 1.A-B显影液 称取上述试剂,按配方分别溶于50ml ddH 2 O中,于显影前,在室温将两者(A液及B液)按1:1混合,稍加摇动促进混合,即可将贴有切片标本的切片放入显影液,于室温避光(可暗室)反应5~15min。显影时间和温度相关,需自己根据情况摸索。...

http://qihuangzhishu.com/969/673.htm

ICC在原位杂交技术中的应用_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

传统的ICC法主要用于检测组织细胞中含有何种物质,根据该物质的作用,推测其组织细胞生理、病理意义。但该物质来自何处,是否是阳性细胞合成往往较难判断,结合免疫电镜及双重染色等方法,在某种程度上,有助于推断该物质的来源。然而通常ICC法显示的是组织细胞已经合成的物质(过去时),本身不能说明阳性组织细胞目前的功能状态,亦无法预测细胞将合成何种物质,发挥什么功能,因...

http://qihuangzhishu.com/969/110.htm

原位杂交技术在染色体和电镜水平的应用_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

原位杂交免疫细胞化学技术的应用除在培养的离散细胞涂片和各种组织制片如恒冷箱冷冻切片、石蜡包埋切片外,又进一步扩展到染色体铺片和电镜水平。现分别予以介绍。

http://qihuangzhishu.com/969/553.htm

应用生物素标记DNA探针电镜原位杂交技术_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

...过碱基配对以一条DNA链为模板,将生物素标记的某一种脱氧三磷酸核苷酸如Bio-dUTP渗入有缺口的DNA链。将生物素标记的DNA探针与细胞或组织进行原位杂交。显示方法有二种:一种是用HRP显示,类似免疫电镜技术中采取的包埋前染色法,利用地高辛-过氧化物酶HRP显色法进行光镜水平的厚片原位杂交免疫细胞化学染色,其步骤与第二十章 叙述的原位杂交免疫细胞化学基本方...

http://qihuangzhishu.com/969/565.htm

应用地高辛标记rRNA探针的电镜原位杂交技术_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

(一)基本原理 在地高辛标记核酸探针广泛用于光镜水平的原位杂交试验并获极为满意的结果后,科学工作者试图将其应用于电镜水平。其基本原理和生物素标记核酸探针-PA-Gold电镜杂交技术的基本原理相似,首先利用地高辛修饰核酸探针,与细胞或组织进行杂交,再用抗地高辛抗血清相连胶体金与之结合,进行细胞或组织特异核苷酸的超威结构定位。为增强金的显示效应,可用银加强法增强...

http://qihuangzhishu.com/969/566.htm

非同位素原位杂交组化与免疫组化联合法_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

...神经肽mRNA和神经肽的共存与共同分布。向正华等发现碱性磷酸酶抗地高辛抗体是经 木瓜 蛋白酶处理的,只有抗体的Fab段没有Fc段,而免疫细胞化学(Immunocytochemistry,ICC)所应用的抗体既有Fab段,又有Fc段。由于抗体的这一特性可在ISHH和ICC抗体孵育时将检测核酸的抗地高辛抗体Fab段与检测蛋白、多肽的兔抗血清混合在一起,一同孵育切...

http://qihuangzhishu.com/969/547.htm

同位素原位杂交组化与免疫组化PAP法的联合程序_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

...(6)PBS冲洗2×3min。 (7)0.25%乙酸酐(0.1mol/L 三乙醇胺配)10min。 (8)2×SSC冲洗10min。 (9)杂交:如是cDNA探针用前需进行变性处理,载片法时将切片在空气中晾干,加含探针的杂交液10μl于切片上,盖上22×22mm的硅化盖片或相当大小看蜡膜, 3 H标记探针每10μl杂交液含1×10 5 cpm探针, 32 P...

http://qihuangzhishu.com/969/546.htm

应用同位素标记cRNA探针电镜原位杂交技术于染色体制片_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

...于2×SSC内(应用0.1n NaOH调整至pH12),室温,2min。 (3) 脱水 ,以70%和95%酒精各冲洗3次,空气干燥。 (4)杂交,金网覆于平面 玻璃 皿( Petri dish)内的杂交液滴上,每滴约10~15μl,将此小碟置于盛于杂交缓冲的大塑料盒内,保持湿润,在60~65℃孵育4~24h。 杂交液的配制:6×SSC或6×TNS(1×TNs...

http://qihuangzhishu.com/969/564.htm

原位分子杂交技术在电镜水平的应用_《实用免疫细胞与核酸》_【中医宝典大全】

自Gall和Pardue建立了原位杂交技术以来近20余年内,这一技术为基因的定位和表达、基因进化、发育生物学、肿瘤学、微生物学、病毒学、医学遗传学和遗传分析等领域研究提供了极其宝贵的资料,发挥了其它技术难以取代的作用。近年来,此一技术的应用领域逐渐扩大并在两个主要进行了技术法的改进。一方面是应用一系列放大手段增强检测的灵敏度(详见二十二章 ),另一方面是提高...

http://zhongyibook.com/shiyongmianyixibaoyuhesuan/969-24-2.html

组织学/组织学研究方法

此部分内容包含以下子章节,请点击标题阅读: 一般光学显微镜术 几种特殊显微镜的应用 组织化学和细胞化学术 免疫细胞化学术 同位素示踪术 原位杂交术 细胞和细胞化学定量术 电子显微镜术 组织培养术 细胞融合术

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