...荧光免疫技术是标记免疫技术中发展最早的一种。很早以来就有一些学者试图将抗体分子与一些示踪物质结合,利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。Coons等于1941年首次采用荧光素进行标记而获得成功。这种以荧光物质标记抗体而进行抗原...
...(一)基本原理应用DNA探针缺口翻译(nick translation)方法,通过碱基配对以一条DNA链为模板,将生物素标记的某一种脱氧三磷酸核苷酸如Bio-dUTP渗入有缺口的DNA链。将生物素标记的DNA探针与细胞或组织进行原位杂交。...
...引物法或末端加尾法等把修饰的核苷酸如生物素-11-dUTP掺入到探针DNA中,制成标记探针,敏感度高于化学修饰法,但操作程序复杂,产量低,成本高。化学修饰法是将不同标记物用化学方法连接到DNA分子上,方法简单,成本低,适用于大量制备(>50μ...
...恶性淋巴瘤总的可分为非何杰金淋巴瘤(NHL)与何杰金氏病两大部分。NHL的免疫功能分类繁多。总体上各类型的瘤细胞的免疫细胞化学标记与相应的正常细胞标记相一致。但是由于瘤细胞的基因有变异,分化不正常,其抗原性也发生变化。因此瘤细胞比相应正常...
...肾活检及对染色组织光镜检查为诊断免疫介导性肾脏病,估计其预后及选择治疗提供了最好的方法。鉴于不同的免疫机制可引起相似的形态学变化,故使用荧光素标记的特异抗体的免疫荧光显微镜检查常也有助于甄别肾脏中免疫成分的类型及定位。 补体沉积的类型和...
...标记是最早采用的也是目前最常用的核酸探针标记方法。常用的放射性同位素有32P和35S。32P因其能量高,信号强,所以最常用。放射性同位素标记探针虽然敏感度高,但却存在辐射危害和半衰期限制(32P半衰期为14.3天,35S半衰期为87.1天,...
...一定条件下互补杂交,然后用偶联有酶或荧光素的羊抗高地辛抗体Tab(抗原结合片段)结合物作为酶标或荧光标记,再分别用显色底物使杂交部位显色或产生荧光以达到检测目的,其反应过程见图20-3。图20-3 地高辛标记的探针检测酶联免疫反应常用的免疫酶...
...可以检测出来,如用更好的方法来检测PCR产物,如放射性同位素,荧光物或酶等掺入到PCR产物中,可进一步提高其灵敏度和适用性。另外,如果采用不同大小标准的DNA进行标记,在电泳时,可同时检测出多种不同的抗原分子。PCR产物的多少与抗原结合量有关...
...检测方法,结果比较客观,将结果打印报告更适合于临床诊断和科学研究,应争取采用这些先进仪器和方法,改进结果的判断,记录和报告。5.免疫酶组织化学检测自身抗体方法免疫酶组织化学间接法可以代替免疫荧光法用于自身抗体的检测,但尚未普遍采用。其优点是...
...此法标记原理如下图所示:标记的HRP部分催化底物化学发光反应:氨基苯二甲酰肼氨基苯二甲酸+N2+光→X-光片上感光10~20min显定影。光亮子在酚、萘及胺类等增强剂促进下,而使光亮增强。这种方法就是利用特殊的酶底物,氧化后把产生的能量...
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