...细胞核内含有3种负责不同RNA转录的RNA多聚酶蛋白聚合体(RNA多聚酶Ⅰ,Ⅱ和Ⅲ)。每种复合体由几种亚单位组成,有些含相同RNA多聚酶成分。三种抗RNA多聚酶均存在自身抗体。这些抗体常在同一病人血清中一起呈现。 阳性:系统性硬皮病为54...
...置于计数器上进行放射性计数。(2)亲合吸附杂交:生物素标记DNA探针与溶液中过量的靶RNA杂交,杂交物吸附到酰化亲合素包被的固相支持物(如小球)上,用特异性抗DNA:RNA杂交物的酶标单克隆抗体与固相支持物上的杂交物反应,加入酶显色底物,这个...
...(一)探针的选择根据不同的杂交实验要求,应选择不同的核酸探针。在大多数情况下,可以选择克隆的DNA或cDNA双链探针。但是在有些情况下,必须选用其它类型的探针如寡核苷酸探针和RNA探针。例如,在检测靶序列上的单个碱基改变时应选用寡核苷酸...
...临床上遇到血清抗HCV阴性,而HCV RNA阳性的情况时,应考虑以下几种可能: (1)急性丙型肝炎的早期:这时虽有病毒血症,HCV RNA阳性,但血清抗HCV常没有出现或滴度低,血清抗HCV检测为阴性。 (2)免疫应答功能低下的人感染丙肝...
...丙型肝炎病毒(hepatitis virus C,HCV)是一小的有囊膜的单股正链RNA病毒,属黄病毒科丙型肝炎病毒属。HCV基因组为一长的开放读码框架(ORF),在其两侧的5′和3′均有非编码区,从5′端开始,编码区由7个基因区组成,即...
...(一)RNA类型细胞内含有三类主要的RNA,即核蛋白体RNA(RibosomalRNA, rRNA)、转运RNA(Transfer RNA,tRNA)及信使(Messenger RNA,mRNA)。1.rRNA。是核蛋白体的组成部分,含量...
...利用寡核苷酸自动合成仪,可很简单地合成制备寡核苷酸探针(如15~50bp),这类探针具有以下优点:①短的探针比长探针杂交速度快,特异性强。②可以在短时间内大量制备。③在合成中进行标记制成探针。④可合成单链探针,避免了用双链DNA探针在杂交...
...RNA聚合酶(RNapolymerase)的作用是转录RNA。有的RNA聚合酶有比较复杂的亚基结构。如大肠杆菌RNA聚合酶有四条多肽链,另有一个促进新RNA分子合成的σ因子,因此它的组成的是α2ββσ。这种结构称为全酶(...
...SSC,10%(0.1%)SDS洗脱。主要是洗去残留的RNA,降低背景。用于以RNA为探针的原位杂交方法中。4.Dig标记探针杂交后处理液用ddH2O溶液并定容至1000ml。用ddH2O溶解并定容至1000ml。配制同上。左旋咪唑有消除...
...执行生命功能、表现生命特征的主要物质是蛋白质分子。DNA贮存着决定生物特征的遗传信息,只有通过蛋白质才能表达出它的生命意义,直接决定蛋白质合成及蛋白质特征的不是RNA而是DNA,因而人们确定DNA是遗传信息贮存者后就推测DNA是通过RNA...
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