...PCR扩增DNA片段只是一个重要手段。扩增片段的检测和分析才是目的,根据研究对象和目的的不同而采用不同的分析法。琼脂糖凝胶电泳可帮助判断扩增产物的大小,有助于扩增产物的鉴定,点杂交除可鉴定扩增产物外,还有助于产物的分型;Southern...
...PCR扩增DNA的原理是:先将含有所需扩增分析序列的靶DNA双链经热变性处理解开为两个寡聚核苷酸单链,然后加入一对根据已知DNA序列由人工合成的与所扩增的DNA两端邻近序列互补的寡聚核苷酸片段作为引物,即左右引物。此引物范围就在包括所欲...
...PCR温度循环至关重要,PCR扩增仪各参数必须准确。自Perkin –Elmer Cetus公司第一台PCR扩增仪问世以来,现已有几十家不同的厂家在国内外生产和销售PCR扩增仪。在短短的几年间,扩增仪经过几代的发展,不断采用新技术,并且...
...用于PCR的标准缓冲液见PCR操作范例。于72℃时,反应体系的pH值将下降1个单位,接近于7.2。二价阳离子的存在至关重要,影响PCR的特异性和产量。实验表明,Mg2+优于Mn2+,而Ca2+无任何作用。1.Mg2+浓度Mg2+的最佳浓度...
...单克隆抗体(Hp-mAb)的资料不多,Hp-mAb免疫过氧化物酶染色检测胃粘膜活检标本,国内未见报道。我们成功地制备了Hp-mAb,对其特性进行了一系列鉴定,并应用于临床检测,现报告如下。1 材料和方法1.1 Hp-mAb的制备Hp109...
...阴道分泌物(vaginaldischarge)为女性生殖性系统分泌的液体,俗称“白带”。主要来自宫颈腺体、前庭大腺,此外还有子宫内膜、阴道粘膜的分泌物等。阴道标本采集前24小时,禁止性交,盆浴、阴道检查、阴道灌洗及局部是药等,以名胜影响...
...人疱疹病毒——一种可在接受器官移植的儿科患者中引起严重后果的病毒——可通过聚合酶链反应(PCR)进行监测。 接受器官移植的儿童往往会由于疱疹病毒的存在而预后极差甚至死亡。德克萨斯大学的R. H. Scheuermann及其同事研究了PCR...
...PCR技术的出现给克隆的筛选增加了一个新手段。如果已知目的序列的长度和两端的序列,则可以设计合成一对引物,以转化细胞所得的DNA为模板进行扩增,若能得到预期长度的PCR产物,则该转化细胞就可能含有目的的序列。...
...RNA的多聚酶链式反应(RT-PCR)是以RNA为模板,联合逆转录反应(reverse transcrip-tion, RT)与PCR,可用于检测单个细胞或少数细胞中少于10个拷贝的特异DNA,为RNA病毒检测提供了方便;并为获得与扩增...
...的细菌都为Hp。Engstrand等选用的16srRNA引物顺序与Ho者不同,作者采用了反向转录PCR技术,先利用反转录酶合成RNA,然后再扩增cDNA。其敏感性比常规PCR提高25~50倍,可检测到2个细菌,检测15份标本,14份标本与...
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