...应用领域逐渐扩大并在两个主要进行了技术法的改进。一方面是应用一系列放大手段增强检测的灵敏度(详见二十二章 ),另一方面是提高其分辨率,即向电镜水平发展。Jacob(1971)首先用3H标记的核酸RNA探针与DNA杂交并在电镜水平显示获得成功,...
...除去未结合的标记抗体溶液,然后转入常规双固定和电镜包埋。(2)间接法:①将组织切片浸于第一抗体液中,室温30~60min。②以大量冷缓冲液充分搅拌洗涤,至少3次,每次30min。③浸入铁蛋白标记抗体液中,室温30min。④如②,用缓冲液充分...
...标记纯化的人IgG,制成免疫用的双抗原。动物免疫。动物:体重分别为2.5kg和3.0kg的雄性家兔2只。免疫:初次免疫是将含HRP20mg,IgG5mg的双抗原加等体积的福氏不完全佐剂多点、多部位注射于每只家兔的四肢。间隔1月后用原剂量的双...
...改变,则可用电子显微镜观察,称为酶免疫电镜技术。酶免疫测定根据抗原抗体反应后是否需要分离结合的与游离的酶标记物而分为均相(homogenous)和异相(heterogenous)两种类型,实际上所有的标记免疫测定均可分成这两类。如以标记抗体...
...基础上发展了非标记酶抗体法。包括酶桥法和过氧化物酶-抗过氧化物酶复合物法(PAP)。这一技术的建立,为医学、生物学的各个领域提供了一个很好的研究手段,在免疫学和免疫病理学的研究和诊断工作中已日益广泛应用。1.免疫酶标技术及其进一步发展 免疫...
...40倍能显示PAP法所不能显示的抗原。这是因为生物素与抗生物素间有较强的结合力,一个抗生物素分子具有可与生物素结合的4个活性部位,其中一部分可与生物素标记的过氧化物酶相结合,另一部分可与生物素标记的免疫球蛋白结合。生物素通过氨基与抗体或...
...标记纯化的人IgG,制成免疫用的双抗原。动物免疫。动物:体重分别为2.5kg和3.0kg的雄性家兔2只。免疫:初次免疫是将含HRP20mg,IgG5mg的双抗原加等体积的福氏不完全佐剂多点、多部位注射于每只家兔的四肢。间隔1月后用原剂量的双...
...观察,称为酶免疫电镜技术。酶免疫测定根据抗原抗体反应后是否需要分离结合的与游离的酶标记物而分为均相(homogenous)和异相(heterogenous)两种类型,实际上所有的标记免疫测定均可分成这两类。如以标记抗体检测标本中的抗原为例,...
...应用免疫电子显微镜技术(常用为PAP法或胶体金标记技术)可显示抗原在神经细胞内的超威结构定位及在突触水平神经元间的联系的化学本质。Pickel应用免疫电镜观察证明TH存在于DA和DA能神经元的细胞体、树突和近侧轴突。在胞体内此酶定位于...
...1.抗人黑色素瘤血清做间接免疫荧光标记黑色素组织,当抗血清稀释为1∶2时,最高阳性率可达89%。 2.用Vacca双PAP免疫酶标记法标记测定,当抗血清稀释度为1∶400时,82.14%呈阳性反应。 3.色素原检查 黑色素原经肾排出后氧化...
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