...(一)基本原理在地高辛标记核酸探针广泛用于光镜水平的原位杂交试验并获极为满意的结果后,科学工作者试图将其应用于电镜水平。其基本原理和生物素标记核酸探针-PA-Gold电镜杂交技术的基本原理相似,首先利用地高辛修饰核酸探针,与细胞或组织进行...
...置于计数器上进行放射性计数。(2)亲合吸附杂交:生物素标记DNA探针与溶液中过量的靶RNA杂交,杂交物吸附到酰化亲合素包被的固相支持物(如小球)上,用特异性抗DNA:RNA杂交物的酶标单克隆抗体与固相支持物上的杂交物反应,加入酶显色底物,这个...
...situ DNA hybridisa-tion , FISH)的应用在细胞培养和染色体铺片(见二十一章 )中较为广泛。FISH属于非放射性标记,其优点在于简便,快速,其敏感性可与放射性同位素标记核酸探针相等。不少实验室报告应用FISH(2~5...
...mol/L EDTA3.探针沉淀液(三)cRNA探针非同位素标记(地高辛及生物素)1.标记液△:生物素标记时为10mmol/L的生物素-11-UTP※:为检测标记率而加。2.转录标记终止液(1)0.2mol/L EDTA:用于地高辛标记法(2)...
...◦ (三)RNA探针 ◦ (四)寡核酸探针 四、核酸探针的标记和检测(详见每十九章 ) ◦ (一)核酸探针的常用酶促标记技术 ◦ (二)核酸探针的非放射性标记技术 ◦ (三)非放射性探针的显示体系 五、核酸分子杂交的类型 ◦ (一)固相膜...
...染色体铺片等的原位杂交中。虽然有些科技工作者认为其敏感度不如来自质粒扩增的cRNA或DNA探针,但由于探针制备简便再加之于近年非放射性标记的成功,寡核苷酸探针在生物基础医学及临床学科领域中得到较为广泛的应用。在原位杂交组织化学中应用寡核苷酸探针...
...对比,可谓一举两得。(二)探针的标记方法在选择探针类型的同时,还需要选择标记方法。探针的标记方法很多,选择什么标记方法主要视个人的习惯和可利用条件而定。但在选择标记方法时,还应考虑实验的要求,如灵敏度和显示方法等。一般认为放射性探针比非...
...标记DNA探针法 五、聚合酶链反应(PCR)标记高活性DNA探针 第四节 非放射性标记的核酸探针 一、生物素标记核酸探针方法 二、光敏生物素标记核酸探针 三、生物素-补骨脂素(Biotin -psoralen)标记法 四、生物素-α-氨基乙酸...
...探针,后者可用光敏生物素制剂BPA标记样品核酸。8.固相膜核酸杂交膜的选用。杂交膜是一种多孔、表面积很大的固相载体,核酸一旦固定在上面,就可用杂交法进行检测。最常使用的膜是硝酸纤维素膜,用于放射性和非放射性标记探针都很方便,产生的本底浅,与...
...hybridisa-tion , FISH)的应用在细胞培养和染色体铺片(见二十一章 )中较为广泛。FISH属于非放射性标记,其优点在于简便,快速,其敏感性可与放射性同位素标记核酸探针相等。不少实验室报告应用FISH(2~5kbp探针)可成功地达到...
所有搜索结果仅供参考,如需解决具体问题请咨询相关领域专业人士。