...年左右。上述两种标记法是ICC研究中最常用的酶标抗体制备方法。3.Maleinmide法上述酶标抗体(IgG)的分子量较大,对抗体的穿透性有一定影响,而在制备过程中,需经两次纯化,即多聚体与单体及单体与非标记抗体的分离。已知单体(1个HRP...
...为了体外研究脂蛋白的细胞代谢和脂蛋白受体活性,早在1974年Goldstein和Brown就建立了成纤维细胞125I标记LDL的配体-受体结合分析法。其基本原理是:用放射性同位素(常用125I)标记LDL后,与细胞(通常为培养的单层成...
...了解和选择。总的说来核酸的分离与纯化是在溶解细胞的基础上,利用苯酚等有机溶剂抽提(核酸溶于缓冲液,即水相),分离,纯化;乙醇、丙酮等有机溶剂沉淀,收获。溶解细胞的方法因标本不同而不同,有用SDS加NaOH,有用蛋白酶,有的用超声波破碎等方法...
...标记方法常用的有缺口平移法、随机引物法、末端标记法等。标记物质有放射性元素(如32P等)和非放射性物质(如生物素、地高辛等)。32P是最常用的核苷酸标记同位素,被标记的dNTP本身就带有磷酸基团,便于标记,特点是比活性高,可达9000Ci/...
...取得良好的效果,而且无骨髓抑制等不良反应,可长期应用,显示出在抗肿瘤方面的良好发展前景。但在多糖类化合物的提取、纯化等方面尚不尽如人意,稳定性较差,还需要继续深入研究。...
...)标记抗体民被检抗原的结合方式有两种。一是直接法,即如上述用标记抗体与样品中的抗原直接结合(图1-8)。这种方法操作简便,但敏感度不及间接法。间接法是将分离的抗体(第一抗体简称一抗)再作为抗原免疫另一种动物,制备该抗体(抗原)的抗体(第二...
...某些蛋白质。 最近,从酵母双杂交系统衍生出一种新的方法,称为“反向双杂交”,主要用于鉴定可以干扰蛋白质间相互作用的化合物和多肽。与传统方式不同,这种方法可以用于开发在体内具有活性的药物。此外,酵母双杂交系统的作用已经扩展至对蛋白质的鉴定,...
...为了体外研究脂蛋白的细胞代谢和脂蛋白受体活性,早在1974年Goldstein和Brown就建立了成纤维细胞125I标记LDL的配体-受体结合分析法。其基本原理是:用放射性同位素(常用125I)标记LDL后,与细胞(通常为培养的单层成...
...光敏DNP由一连接臂组成,一端是2,4-二硝基苯,另一端有芳基叠氮化合物。此法适用于含氨基检测基团。其敏感性和光敏生物素标记探针相同,检测时需要抗DNP抗体和免疫化学显色。标记方法:(1)DNA不心变性,必须溶于水中,取2~10μg10μ...
...到目前为止、尚缺乏诊断的金标准,常用方法有: 1 亲近人的反馈法:根据亲人、朋友或配偶的反馈意见来评定。 2 感观感受分析法:该分析方法选择以下6个参数。①全口呼吸气味;②言语气味,又称20记数试验;③舌背前区气味,又称舔腕试验;④舌背后...
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