...改为Bio –11 –dUTP,也可以在3’端标记上一个生物素。寡核苷酸35S的3’—末端标记法:将下列液体依次加入Eppendorf管中。寡核苷酸(1 pmol)1μl10×Tailingbuffer 2μl[α-35S]2μl双蒸馏水...
...(一)基本原理地高辛(Digoxigenin 简写Digo-)又称异羟基洋地黄毒甙配基,这种类固醇半抗原仅限于洋地黄类植物,其抗体与其它任何固醇类似物如人体中的性激素等无交叉反应,地高辛配基标记于脱氧尿嘧啶三磷酸核苷(dUTP)上形成...
...光化学与免疫法 (一)光化学治疗(puva) 补骨脂素或其衍生物加紫外线可作用于表皮内与受损细胞邻近尚未完破坏或正常的黑素细胞,刺激这些细胞的功能,使酪氨酸酶催化黑素的合成,促进黑素细胞的分裂和移动,致使白斑的色素逐渐恢复。白斑的色素再生...
...光化学与免疫法 (一)光化学治疗(puva) 补骨脂素或其衍生物加紫外线可作用于表皮内与受损细胞邻近尚未完破坏或正常的黑素细胞,刺激这些细胞的功能,使酪氨酸酶催化黑素的合成,促进黑素细胞的分裂和移动,致使白斑的色素逐渐恢复。白斑的色素再生...
...加DNA聚合酶(SABC)8u,混匀,37℃,2h,加0.5mol/l EDTA(Ph8.0)2μl,终止反应。在随机引物标记体系中,加入不同梯度浓度比值的Bio-11-dUTP/dTTP(%),发现二者比值明显影响探针标记率和显色灵敏度。...
...应用领域逐渐扩大并在两个主要进行了技术法的改进。一方面是应用一系列放大手段增强检测的灵敏度(详见二十二章 ),另一方面是提高其分辨率,即向电镜水平发展。Jacob(1971)首先用3H标记的核酸RNA探针与DNA杂交并在电镜水平显示获得成功,...
...要合成一对特异性PCR引物。使用从探针DNA上制备的小片段作引物也能取得较好的标记效果。(二)核酸探针的非放射性标记技术1.光敏生物素标记核酸 目前使用的光标生物素试剂有两种:光生物素(乙酸盐)和补骨脂素生物素。它们都是由一个光敏基团、一个...
...分子杂交技术在电镜水平的应用中,胶体金的标记术被科技工作者认为是当前最理想的标记物(详见第二十章 )。一、电镜水平的免疫金染色法应用于电镜水平的免疫法,可分为包埋前染色和包埋后染色,由于包埋前染色对细胞膜的穿透性差,一般只用于细胞表面的抗原...
...凝集素可为荧光素、酶和生物素等所标记,分别进行下列染色法:1.直接法 标记物直接标记在凝集素上,使之直接与切片中的相应糖蛋白或糖脂相结合。(1)切片脱蜡至水。(2)凝集素标记物(100μg/ml),室温,30min。(3)TBS洗3次,...
....缺口平移试剂盒(Amersham和BRL公司)8.生物素7-dATP(BRL)9.糖原(BRL)10.RNA酶A(Sigma)(1)储备液称取RNA酶A 1g溶于100ml醋酸钠中,置沸水中煮10min,分装后储于-20℃。(2)工作液用...
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