...蔡文琴,等.用光敏生物素反意生长抑素(SS)cRNA探针显示组织切片中ss mRNA。解剖学杂志,1992,15(4):312~31313.正向华,张俐.应用反意生长抑素cRNA探针原位杂交显示大鼠下丘脑生长抑素mRNA.解剖学杂志,...
...(1)将整封染色体铺片放置于金网上,在70%的酒精蒸汽固定4~15h,空气干燥。(2)以强碱使DNA变性,将金网置于2×SSC内(应用0.1n NaOH调整至pH12),室温,2min。(3)脱水,以70%和95%酒精各冲洗3次,空气干燥...
...了生物素-亲合素中间步骤,可减少非特异性反应。4.生物素酰肼胞嘧啶修饰法在亚硫酸盐催化下,生物素酰肼可置换寡核苷酸探针中胞嘧啶上的氨基而得生物素化寡核苷酸探针。5.寡核苷酸的酶促加尾标记法在末端转移酶的作用下,用非放射性物质修饰的核苷酸(...
...方法(详见第二十章 )。在检测某种特定的蛋白质在哪一类细胞内合成时,常常应用连续切片或镜影切片,原位杂交法显示合成该蛋白质的mRNA,ICC法染色其蛋白质抗原,二者存在于同一细胞时,具有较强的说服力。同一切片进行上述双重染色时,原位杂交步骤中...
...了生物素-亲合素中间步骤,可减少非特异性反应。4.生物素酰肼胞嘧啶修饰法在亚硫酸盐催化下,生物素酰肼可置换寡核苷酸探针中胞嘧啶上的氨基而得生物素化寡核苷酸探针。5.寡核苷酸的酶促加尾标记法在末端转移酶的作用下,用非放射性物质修饰的核苷酸(...
...释放β放射线能量太低(0.018Mev),只能用于组织原位杂交。由于同位素标记的探针在使用过程中存在着上述缺点,近些年来,人们在寻找非航船性标记物方面取得了很大进展,国际上已有多家公司相继推出多种非放射性探针标记试剂盒,在国内也已具备生物素类...
...1.光敏生物素标记核酸 目前使用的光标生物素试剂有两种:光生物素(乙酸盐)和补骨脂素生物素。它们都是由一个光敏基团、一个连接臂和一个生物素基团组成。光生物素的光敏基团是-N3,它在光作用下可与核酸中的碱基结合。补骨脂素生物素中的光敏基团...
...探针制备就是目的基因的标记,核酸标记方法常用的有缺口平移法、随机引物法、末端标记法等。标记物质有放射性元素(如32P等)和非放射性物质(如生物素、地高辛等)。32P是最常用的核苷酸标记同位素,被标记的dNTP本身就带有磷酸基团,便于标记,...
...Biotin–Peroxidase Complex technique, 简称ABC技术)(1)基本原理:ABC法是Hsu 等于1981年在HRAB法和LAB法的基础上改良的,其特点是利用抗生物素分别连接生物素标记的第二抗体和生物素标记的酶。与...
...过氧化物酶-抗过氧化物酶(PAP)技术,使免疫细胞化学得到日益广泛的应用。80年代,Hsu等建立了抗生物素-生物素(ABC)法之后,免疫金-银染色法、半抗原标记法、免疫电镜技术等相继问世,使免疫细胞化学技术成为当今生物医学中形态、功能、代谢...
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