原位杂交免疫细胞化学技术的应用除在培养的离散细胞涂片和各种组织制片如恒冷箱冷冻切片、石蜡包埋切片外，又进一步扩展到染色体铺片和电镜水平。现分别予以介绍。
1961年Hall开拓了液相核酸杂交技术的研究，其基本原理是利用核酸分子单链之间有互补的碱基顺序，通过碱基对之间非共价键的形成，出现稳定的双链区，形成杂交的双链。自此以后，由于分子生物学技术的迅猛发展，特别是70年代末到80年代初，分子克隆、质粒和噬菌体DNA的构建成功，核酸自动合成仪的诞生，大大丰富了核酸探针的来源，新的核酸分子杂交类型和方法不断涌现。按其...
虽然一般认为DNA探针敏感度不如cRNA探针，但在病毒的检测等领域中DNA探针仍得到广泛的应用。 在原位杂交细胞化学的操作步骤方面与cRNA探针基本相同，所不同的是：（1）杂交时需先在高温80～95℃短时处理，使DNA探针及细胞内靶DNA变性，解离成单链，迅置于冰上冷却。然后置于37℃～42℃杂交过夜。（2）RNA酶的溶液的冲洗不能减低背景，因此，在操作步骤...
...（6）PBS冲洗2×3min。 （7）0.25%乙酸酐（0.1mol/L 三乙醇胺配）10min。 （8）2×SSC冲洗10min。 （9）杂交：如是cDNA探针用前需进行变性处理，载片法时将切片在空气中晾干，加含探针的杂交液10μl于切片上，盖上22×22mm的硅化盖片或相当大小看蜡膜， 3 H标记探针每10μl杂交液含1×10 5 cpm探针， 32 P...
...RNA探针，将其溶于适量的灭菌双蒸水，用紫外分光亮度计测探针的光密度（详第十九章 ），其最佳工作浓度为2μg/ml。 切片的制作、预处理、预杂交、杂交和杂交后冲洗的方法同概述中基本方法一节 。 光敏生物素核酸探针原位杂交组化程序： （1）石蜡切片脱蜡入水后，置0.1mol/l PBS pH7.2冲洗5min；冰冻切片直接入PBS冲洗5min。 （2）0.1m...
核酸 是生物体内的 高分子化合物 ，包括 DNA 和 RNA 两大类。 一、元素组成 组成核酸的元素有C、H、O、N、P等，与 蛋白质 比较，其组成上有两个特点：一是核酸一般不含元素S，二是核酸中P元素的含量较多并且恒定，约占9～10%。因此，核酸定量测定的经典方法，是以测定P含量来代表核酸量。 二、 化学 组成与基本单位 核酸经水解可得到很多 核苷酸 ，因...
核酸 是由 核苷酸 聚合而成的 高分子化合物 ，是所有 生物 遗传信息 的 携带者 。根据核苷酸 分子 中 戊糖 的类型，将核酸分为 脱氧核糖核酸 ( DNA )和 核糖核酸 ( RNA )两大类。 核苷酸由 磷酸基 、戊糖和 含氮碱基 组成， 碱基 包括嘌呤和 嘧啶 两大类。DNA一般含A、C、G、T四种碱基，RNA含A、C、G、U四种碱基。 四种核苷酸按...
核酸是生物体内的高分子化合物，包括DNA和RNA两大类。
...(nuclein)；后来他又从鲭鱼 精子 中分离出类似的物质，并指出它是由一种 碱性蛋白质 与一种酸性物质组成的，此酸性物质即是现在所知的 核酸 (nucleic acid)。1944年Oswald Avery,Colin Macleod和Maclyn McCarty发现，一种有夹膜、具 致病性 的 肺炎 球菌中提取的核酸桪NA(deoxyribonucle...
...H值调至7.0，补足ddH 2 O至1000ml，加入终浓度为0.1%～0.2%的DEPC，分装后高压灭菌，可室温保存。 该液主要用于配制予杂交液及杂交后的各种洗脱液，以保持一定的离子强度。此外，在用于杂交的湿盒内也常用5×的SSC以保持一定湿度。 2．Denhardt’s液 通常配成10×，50×或100×的储备液 配制：称取上述试剂，溶于800ml左右灭...
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