三硝基苯磺酸(TNBS)标记核酸探针_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

在温和的条件下,TNBS将核酸的胞嘧啶转化为N-甲氧基-5,6-二氢嘧啶-6-磺酸盐衍生物,对胞嘧啶残基进行磺化修饰制成磺化半抗原探针。此法十分简便,也可用于蛋白质的标记标记方法:取变性单链的DNA5μg,溶于0.02mol/L硼酸钠缓冲液(pH8.6)中,加入TNBS5μg溶解,在室温中反应1h。移入冰浴中,加入无水乙醇和70%乙醇各洗1次,晾干,用50...

http://qihuangzhishu.com/969/527.htm

放射性碘标记_《实用免疫细胞与核酸》在线阅读_【中医宝典】

在RIA中,标记抗原质量的优劣,直接影响测定结果,必须制备比放射性强、纯度高的标记抗原,并保持免疫活性不受丧失。

http://zhongyibaodian.com/shiyongmianyixibaoyuhesuan/969-11-2.html

地高辛标记cRNA探针的应用_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

...-)又称异羟基洋 地黄 毒甙配基,这种类固醇半抗原仅限于 洋地黄 类植物,其抗体与其它任何固醇类似物如人体中的性激素等无交叉反应,地高辛配基标记于脱氧尿嘧啶三磷酸核苷(dUTP)上形成digoxigenin –11-dUTP(图20-3)。通过随机引物或缺口翻译法(多用随机引物法),将dig-11-dUTP与探针的核酸分子相连,构成Dig-配基标记核酸探针...

http://qihuangzhishu.com/969/541.htm

免疫标记方法_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

金属类标记物的免疫标记法同切片免疫染色,即将标记物与抗体相结合,通过直接或间接法显示抗原部位。胶体金可与蛋白A相结合后与IgG分子中的Fc 段相结合。哪与卵白素(a-vidin)相结合可与结合抗体的生物素(biotin)反应。免疫金银染色法在胶体金标记后,再进行银液显影。病毒(包括噬菌体)标记物多采用不标记抗体法,即搭桥法。此法的原理是采用同种动物制备抗原的...

http://qihuangzhishu.com/969/212.htm

免疫电镜胶体金标记法_《实用免疫细胞与核酸》_【中医宝典大全】

...标法是Faulk和Taylor(1971)提出的,并首先用于免疫电镜。它是利用胶体金在碱性环境中带有负电的性质,使其与抗体相吸附,从而将抗体标记。当用金标记的抗体与抗原反应时,在光镜水平胶金液呈现鲜艳的樱红色,不需加外进行染色。在电镜水平,金颗粒具有很高的电子密度,清晰可辨。因此,免疫电镜胶体金标记法近年来被成功地应用于生物学的各个方面,并取得了要喜的进展,...

http://zhongyibook.com/shiyongmianyixibaoyuhesuan/969-10-4.html

常用标记抗体_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

用于 软组织肿瘤 可在石蜡切片表达的抗体已有多种,请参见表12-1。 表12-1 软组织细胞可用的标记抗体 抗原名称 标记细胞 (1)角蛋白(Keratin) 上皮与肌上皮细胞 (2)波纹蛋(Vimentin) 间叶分化细胞、内皮细胞 (3)结蛋白(Desmin) 肌组织分化细胞 (4)肌动蛋白(Actin) 肌细胞,肌上皮细胞,肌纤维 (5)肌浆球蛋白(M...

http://qihuangzhishu.com/969/288.htm

异羟基洋地黄毒甙(Digoxigenin)标记核酸探针_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

1988年德国Boehringer Manheims公司推出了一种地高辛标记DNA检 测试 剂盒。先将地高辛甙元通过一手臂联接至dUTP上,用随机引物法标记DNA制成探针。平均每20~25个核苷酸中标记一个地高辛甙元,然后用抗地高辛抗体的Fab片段与碱性磷酸酶的复合物和NBt – BCIP底物显色检测,灵敏度达0.1pg DNA,因此可做1μg哺乳动物DNA...

http://qihuangzhishu.com/969/525.htm

地高辛配基随机标记DNA探针法_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

(一)概述 基因诊断是以核酸分子杂交技术为基础,在核酸水平检测 人类 遗传性疾病的基因缺陷和一些 传染病 病原体的方法。其基本过程是:制备DNA探针,标记探针,检测样本。开展这项工作的关键是要得到高灵敏度、高特异性的探针。以往人们是用放射性同位素来标记探针DNA。近年来,非同位素标记方法发展很快,已有取代同位素标记法的趋势。地高辛配基随机标记DNA探针法,是...

http://qihuangzhishu.com/969/645.htm

关于探针的标记_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

(一)cRNA探针的同位素标记 1.标记液(转录标记) 2.转录缓冲液 ※:用地高辛或生物素标记时,用UTP替代。 3.标记终止液 4.标记探针水解液 先用dH 2 O悬浮探针,再加入后两种试剂,轻轻振摇混合,于60℃条件下反应。 5.探针水解时间 注:L O -探针初始长度(kb) L f -探针的终长度(kb) K-0.11kb/min 6.探针水解终止...

http://qihuangzhishu.com/969/666.htm

遗传标记

遗传标记是指在遗传分析上用作标记的 基因 ,也称为 标记基因 。在 重组 实验中多用于测定重组型和双亲型。作为标记基因,其功能不一定研究得很清楚但应 突变 性状是明确的,所以容易测定。对于微生物虽多用与生化性状有关的基因,但对高等生物则多用与形态性状有关的基因。也有用着丝粒作为遗传标记的。在微生物遗传学中遗传标记还区分为选择性标记(或称选择性基因)和非选择性...

http://zhongyibaodian.net/a/170957.html

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