分为包埋前染色、包埋后染色和超薄切片免疫染色三种。 1．包埋前染色 即先行免疫染色，在解剖显微镜下将免疫反应阳性部位取出，修整成小块，按常规电镜方法处理，经锇酸固定、 脱水 、包埋。如果特异性免疫反应的范围太小，为了准确定位，可作第二次包埋，即第一次包埋时将组织置于两层thermanox塑料片之间，中夹环氧树脂如夹心面包式，进行高温聚合，然后在解剖显微镜下取...
可在细胞涂片或组织切片上进行免疫染色。一般程序是：①标记抗体与标本中抗原反应结合；②用PBS洗去未结合的成分；③直接观察结果（免疫荧光直接法）；或显色后再用显微镜观察（免疫酶直接法）。在此基础上发展出间接法，多层法，双标记法等各种方法，将在本书各有关章 节 内详述。 在免疫染色中应特别注意增强特异性染色，减少或消除非特异性染色。在各种免疫染色中都必须注意以下...
...酸（0.1mol/l PBS溶液）1h。 （13）双蒸水洗15min。 （14）系列酒精或丙酮 脱水 ，包埋、超薄切片。（15）枸椽酸铅对照染色。 为增加抗非特异性染色，有的实验室倾向在TBS中加入1%小 牛血 清白蛋白（Bovine Serum Albumin, BSA, Sigma）。理想的免疫金染色切片，背景应清洁，无残留的金或其他无机盐颗粒，金粒集中...
...合作准备。 （9）胶体金标记抗体液1：30～1：100，淡红色为适宜稀释液，室温孵育10min至1h。 （10）双蒸水洗3min，3次。 如作双重染色，则应将镍网翻过来，用另一类抗体血清，重复上述步骤（2）～（10）。 （11）5%醋酸铀（双蒸水配制）染5min，然后用双蒸水洗。 （12） 枸橼 酸铀（或醋酸铅）染色5min，双蒸水洗净。 （13）电镜观察。
1．原理染色体的化学成份是核酸和蛋白质两部分。核酸以DNA为主，蛋白质有组蛋白和非组蛋白两种。因此染色体经蛋白水解酶类物质处理后，蛋白质已被水解而使DNA分子中碱基暴露，由于碱基中G/C和A/T组合的比例不同，对染料结合的程度不一，如这一段A/T碱基的成份多，则Giemsa染料易与它结合成深染；另一段G/C碱基的成份多，则Giemsa染料不易与其结合，结果成...
在同一标本上有两个抗原需要同时显示（如A抗原和B抗原），A抗原的抗体用FITC标记，B抗原的抗体用罗达明标记，可采用以下染色方法： 1．一步法双染色 先将两种标记抗体按适当比例混合（A+B），按直接法进行染色。 2．二步法双染色 先用RB200标记的B抗体染色，不必洗去，再用FITC标记的A抗体染色，按间接法进行。 结果：A抗原阳性荧光呈现绿色，B抗原阳性呈...
...害，能安全、稳定地转给后代，使基因的性状得到连续的表达。这对校正某种遗传缺陷或改进某种性状都是十分有用的。目前一些实验室正致力于构建人工微小染色体（microchromosome）。 构建染色体应包括：基因、复制起点、着丝粒和端粒。染色体上需带有基因是不言而喻的。复制起点是染色体复制所不可缺少的。着丝粒保证复制后的染色体均等地分配到两个子细胞中。端粒具有某种...
核酸 指由许多 核苷酸 聚合而成的生物大分子 化合物 ，为生命的最基本物质之一。最早由米歇尔于1868年在 脓细胞 中发现和分离出来。核酸广泛存在于所有动物、植物细胞、微生物内、生物体内核酸常与 蛋白质 结合形成核 蛋白 。不同的核酸，其 化学 组成、核苷酸排列顺序等不同。根据化学组成不同，核酸可分为 核糖核酸 ，简称RNA和 脱氧核糖核酸 ，简称DNA。D...
通常染色、着色较弱时，应想办法改进标本的处理的抗原的保存，提高抗体的穿透力，再重新染色。但有时组织本身抗原含量较少或标本难得（如手术材料），可尝试下述方法以提高染色强度，确保染色成功。 1．重复显色 一般认为，对ALP标记抗体，延长显色时间其反应可增强。但在同一染色液中延长显色时间，往往容易产生沉淀，出现终产物弥散现象。所以重新配制显色液继续呈色，第二孵育时...
1．基本原理 酶标抗体与荧光色素标记抗体的染色相同，亦分直接法和间接法。直接法是将酶直接标记在每一抗体上，间接法是将酶标记在第二抗体上，检测组织细胞内的特定抗原物质。间接法所用的第一抗体是对组织细胞内某种抗原的特异性抗体（80%～90%的抗血清系由家兔制得，而绝大数单克隆抗体系由小鼠制备）；第二抗体则为第一抗体（家兔/小鼠的IgG）的抗体。所以，只要不同的第...
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