...酶活性。第三,DNA探针的标记方法较成熟,有多种方法可供选择,如缺口平移法、随机引物法、PCR标记法等,能用于同位素和非同位素标记。(二)cDNA探针cDNA是指互补于mRNA的DNA分子(complementary DNA)。cDNA是由...
...和277bp两个片段,不存在XbaⅠ酶切位点(X-)的等位基因,PCR产物经酶切后仍为其产物710bp片段。RFLP是由于4154位密码子改变(GAA→AAA),使原有的EcoRⅠ酶切位点消失,氨基酸序列中赖氨酸取代谷氨酸,存在EcoRⅠ...
...基因诊断问世以前,培养是世界卫生组织推荐的筛选淋病的唯一方法。目前国外推荐选择培养基有改良的Thayer-Martin(TM)培养基和New York City(NYC)培养基。国内采用巧克力琼脂或血琼脂培养基,均含有抗生素,可选择地抑制许多...
...观察到,而且原先需要一、二周才能作出的诊断可以缩短至数小时。PCR反应的原理如图13-7。图13-7 PCR原理示意图黑色线代表引物由图可见,首先应按照欲检测的DNA的5’和3’端的碱基顺序各合成一段长约17-20余个碱基的寡核苷酸作为引物(...
...去除第一引物。此方法已成功地用来分析中国仓鼠卵巢细胞AS52的分子突变。AS52细胞含有单拷贝的细胞gpt(guanine phos-phribosytransferase)基因,与哺乳动物具有同源性。套式引物PCR减少了引物非特异性退火,...
...在聚丙烯管中可以对多种含膜板材料进行PCR,而在显微玻片上用组织细胞涂片或切片直接进行DNA扩增的方法就称为玻片PCR(Slide-PCR)。图22-3 锚定PCR原理示意图先将细胞涂片或呈单层细胞,然后用甲醇/醋酸(3:1,V/V)、...
...DNA序列的获得是将其转化为简易、高效的PCR鉴别以及高通量芯片鉴别的基础,同时大量序列的获得,也为中药材比较基因组学的研究提供了可能和基础。 二、大力开发新型实用的中药材分子标记鉴别方法和试剂盒 。中药材DNA降解严重,合适的DNA提取和...
...缺失部位内点突变RFLP分析 ASO杂交PCR产物的多态性分析(RFLP、SSCP、DGGE)突变导致其切点消失的限制酶 正常和异常的ASO探针引物包括突变部位基因已知但异常不明基因内或旁侧序列多态性(RFLP、AMP-FLP,SSCP)连锁...
...主要突变进行筛查。四、RFLP连锁分析法限制性片段长度多态性(restriction fragment lengthpolymorphism,RFLP)是采用不同的限制性核酸内切酶酶切和多种cDNA片段探针,根据DNA多态性片段的出现,确定...
...主要突变进行筛查。四、RFLP连锁分析法限制性片段长度多态性(restriction fragment lengthpolymorphism,RFLP)是采用不同的限制性核酸内切酶酶切和多种cDNA片段探针,根据DNA多态性片段的出现,确定...
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