...Gall 和Pardue首先用爪蟾核糖体基因探针与其卵母细胞杂交,确定该基因定位于卵母细胞的核仁中。与此同时,Buongiorno – Nardelli和Amaldi,John及其同事等相继利用同位素标记核酸探针进行了细胞或组织的基因定位,从而...
...微生物学和免疫学杂志,1990;10:1746.马立人刘耀清.光敏生物素核酸探针标记和检测试剂盒使用说明.军事医学科学院放射医学研究所,1989:67.马风林.生物素标记核酸探针技术.生物化学与生物物理进展,1989;16(27):15~178....
...◦ (三)RNA探针 ◦ (四)寡核酸探针 四、核酸探针的标记和检测(详见每十九章 ) ◦ (一)核酸探针的常用酶促标记技术 ◦ (二)核酸探针的非放射性标记技术 ◦ (三)非放射性探针的显示体系 五、核酸分子杂交的类型 ◦ (一)固相膜...
...自1969年以来,我们高兴的看到原位杂交免疫细胞化学技术已从分子生物学的一个分支发展成为生命科学的有效的研究方法。在原位杂交免疫细胞化学发展过程中两个关键性的突破是核酸探针制备的标记物的改进。核酸探针由克隆的核酸探针发展到无克隆的合成的...
...概述中基本方法一节 。光敏生物素核酸探针原位杂交组化程序:(1)石蜡切片脱蜡入水后,置0.1mol/l PBS pH7.2冲洗5min;冰冻切片直接入PBS冲洗5min。(2)0.1mol/l 甘氨酸PBS冲洗5min。(3)0.4...
... 一、DNA变性 二、复性 第三节 分子杂交 一、概述 二、探针-靶反应 三、核酸探针的种类 (一)DNA探针 (二)cDNA探针 (三)RNA探针 (四)寡核酸探针 四、核酸探针的标记和检测(详见每十九章 ) (一)核酸探针的常用酶促...
...克隆、质粒和噬菌体DNA的构建成功,核酸自动合成仪的诞生,大大丰富了核酸探针的来源,新的核酸分子杂交类型和方法不断涌现。按其作用方式可大致分为固相杂交和液相杂交两种:液相杂交是指参加反应的两条核酸链都游离在溶液中,而固相杂交是将参加反应的一条...
...如前所述,由于核酸探针的种类和标记物的不同,在具体应用的技术方法上也各有差异,但其基本方法和应用原则大致相同。大致可分为:①杂交前准备,包括固定、取材、玻片和组织的处理,如何增强核酸探针的穿透性、减低背景染色等;②杂交;③杂交后处理;④...
...塑料袋,用剪刀剪开一角,尽可能挤净预杂交液,用吸管或大枪头将杂交液加入袋中,用恰好足量的液体保持滤膜湿润(50ul/cm2)。溶液的组成是6×SSC,0.01mol/L EDTA,变性的标记核酸探针,5×Denhardt液,0.5%SDS,...
...(一)概述基因诊断是以核酸分子杂交技术为基础,在核酸水平检测人类遗传性疾病的基因缺陷和一些传染病病原体的方法。其基本过程是:制备DNA探针,标记探针,检测样本。开展这项工作的关键是要得到高灵敏度、高特异性的探针。以往人们是用放射性同位素来...
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