...Sepharose和寡(dT)-纤维素使人们能从总RNA中分离PolyA+ RNA。用mRNA的经纯化技术可从网织红细胞总RNA中制备α-和β-珠蛋白mRNA混合物。这些珠蛋白mRNA首次被用于合成特异的探针以分析珠蛋白基因的表达。由于制备...
...DNA片段均参入了标记物,用此法标记的探针标记率高达97.4%。此法重复性好,简便、快速、特异、不要求模板DNA的纯度,可以大量制备。此法有普遍应用价值。标记方法如下:待标DNA模板1ng,50mmol/L KCl, 10mmol/L ...
...磺酸(TNBS)标记核酸探针 十、生物素化的RNA探针标记 十一、辣根过氧化物酶标记核酸探针法 十二、用聚合酶链反应标记高活性DNA探针 第五节 寡核苷酸探针的制备 参考文献 第二十章 原位杂交组织化学 第一节 原位杂交组织化学概述 一、...
...十二、用聚合酶链反应标记高活性DNA探针 第五节 寡核苷酸探针的制备 参考文献 第二十章 原位杂交组织化学 第一节 原位杂交组织化学概述 一、核酸分子杂交技术 二、原位杂交组织化学技术的由来及发展 三、原位杂交组织化学技术的基本方法 第二节...
...包埋组织切片Warthin-Starry银染、细菌培养、寡核苷酸探针尼龙膜杂交及聚合酶链反应(PCR)检测。18只猫中有15只UAT阳性,用Skirrow选择性培养基在37°C、5%的微氧环境下培养出3株Hp样细菌,培养基中加猫血或羊血比用...
...包埋组织切片Warthin-Starry银染、细菌培养、寡核苷酸探针尼龙膜杂交及聚合酶链反应(PCR)检测。18只猫中有15只UAT阳性,用Skirrow选择性培养基在37°C、5%的微氧环境下培养出3株Hp样细菌,培养基中加猫血或羊血比用...
...高。由于地高辛具有灵敏度及分辨率高,反应产物颜色鲜艳,反差好,背景染色低,制备探针可较长期保存,对人体无害等优点,已日益显示出它的优越性和广泛的应用前景。它不仅可应用于原位杂交细胞化学,还可应用于Southern印迹杂交法检测特定基因组序列...
...反应参数应选择最佳数值。使用大片段双股DNA探针检测PCR产物,而不用合成的寡核苷酸探针,因为这样可通过标记得到较高、特异的放射活性。另外,大片段探针能最大减少野生株tpp47可变序列的假阴性结果及由于Taq DNA聚合酶的错误导致碱基替代...
...硝酸纤维素滤膜上,再用放射性或非放射性标记物标记的探针杂交。点杂交还有助于检测突变DNA的突变类型,用于人类遗传病诊断和某些基因的分型。放射性同位素32P标记的寡核苷酸探针检测的敏感性、特异性和方法的可靠性均不容怀疑,对人们认识某些疾病与...
...生物素-补骨脂素是另一种生物素光敏物质,在长波长紫外线照射下与嘧啶碱基发生光化学反应,加成到DNA中,去除小分子后,得到生物素标记核酸探针。此法可标记单链或双链DNA或RNA,及寡核苷酸。灵敏度与放射性探针相当。标记方法:取DNA或片段...
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