...分子探针 第一节 概述 第二节 核酸(基因)探针目的核酸的制备技术 一、特异性目的核酸(或基因)的制备 二、目的核酸的扩增 第三节 放射性同位素标记核酸探针 一、缺口平移法 二、末端标记法 三、应用特异单引物法标记DNA探针 四、双引物法...
...的制备 二、目的核酸的扩增 第三节 放射性同位素标记核酸探针 一、缺口平移法 二、末端标记法 三、应用特异单引物法标记DNA探针 四、双引物法标记DNA探针法 五、聚合酶链反应(PCR)标记高活性DNA探针 第四节 非放射性标记的核酸探针 ...
...要扩增模板DNA,首先要设计两条寡核苷酸引物,所谓引物,实际上就是两段与待扩增靶DNA序列互补的寡核苷酸片段,两引物间距离决定扩增片段的长度,两引物的5’端决定扩增产物的两个5’末端位置。由此可见,引物是决定PCR扩增片段长度、位置和结果...
...可以无限繁殖,取之不尽,制备方法简便。②DNA探针不易降解(相对RNA而言),一般能有效抑制DNA酶活性。③DNA探针的标记方法较成熟,有多种方法可供选择,如缺口平移,随机引物法,PCR标记法等,能用于同位素和非同位素标记。(二)cDNA探针...
...):1~419.吉昌华.应用特异性双引物法标记DNA探针.第四军医大学学报,1991;12(1):6620.吉昌华.应用聚合酶链反应标记高活性DNA探针.第四军医大学学报,1990;11(4):31621. WangBo –yun(王伯沄)...
...):1~419.吉昌华.应用特异性双引物法标记DNA探针.第四军医大学学报,1991;12(1):6620.吉昌华.应用聚合酶链反应标记高活性DNA探针.第四军医大学学报,1990;11(4):31621. WangBo –yun(王伯沄)...
...生物素-补骨脂素是另一种生物素光敏物质,在长波长紫外线照射下与嘧啶碱基发生光化学反应,加成到DNA中,去除小分子后,得到生物素标记核酸探针。此法可标记单链或双链DNA或RNA,及寡核苷酸。灵敏度与放射性探针相当。标记方法:取DNA或片段...
...平称并在平移过程中形成标记的新生核酸链。此法也适用于探针的非放射性标记。如32P标记DNA探针(缺口平移法):反应体积为25μl,内含0.3μgDNA片段,4μl 0.2μmol/L dNTP, 1.1×106Bq [α-32P]dATP,...
...labelling,PRINS),又叫寡核苷酸启动法(Oligonucleotide-priming method)是Koch(1987)首先提出的,其基本原理是将未标记的寡核苷酸探针与细胞或组织中的靶DNA或RNA进行杂交,然后该寡核苷酸探针充当引物...
...在暗盒中日光进行放射自显影。结合了同位素标记探针的DNA片段所在部位将显示黑色的杂交带,基因的缺失或突变则可能导致带的缺失或位置改变。分子杂交是基因探测的基础,除了用印迹杂交外,还有斑点杂交法。即将DNA样品变性后直接点在硝酸纤维滤膜上,再...
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