上述传统的HLA分型方法有许多不足之处,近年来国内外已将HLA分型技术由 抗原 水平发展到 基因 水平。 (一)限制性片段长度 多态性 检测技术 这是首先建立的对多态性进行检测的 DNA 分析技术。个体间抗原特异性来自 氨基酸 顺序的差别,后者由编码基因的 碱基顺序 不同所决定。这种碱基顺序的差别造成 限制性内切酶 识位置及 酶切位点 数目的不同,从而产生数...
...w特异性与HLA-DP特异性可分别通过 纯合 分型 细胞 (homozygote typing cell,HTC)及预 致敏淋巴细胞 试验(primed lymphocyte test,PLT)检测。二种方法的基本原理均是判断 淋巴细胞 在识别非已HLA 抗原决定簇 后发生的 增殖 反应。由于分型细胞来源困难以及操作手续繁琐, 细胞学 分型技术下正逐渐淘汰。
酶免疫技术是以酶标记的抗体或抗原为主要试剂的方法,是标记免疫技术的一种。近年来标记免疫技术飞速发展,应用不同标记物,根据不同原理、不同技术建立起来的检测方法层出不穷,而方法的创建者往往给同类的方法以不同的名称。因此确知某一方法属于哪一类型,对该方法的正确理解有着重要意义。本节先叙述各种标记免疫技术的要点,然后介绍酶免疫技术的分类,这样可以对酶免疫技术和其他非...
双向电泳 (two-dimensional electrophoresis) 是 等电聚焦 电泳和SDS-PAGE的组合,即先进行等电聚焦电泳(按照pI分离),然后再进行SDS-PAGE(按照 分子 大小),经 染色 得到的电泳图是个二维分布的 蛋白质 图。 蛋白质组 研究的发展以双向电泳技术作为核心. 双向电泳由O’Farrell’s于1975年首次建立并...
双向电泳 (two-dimensional electrophoresis) 是 等电聚焦 电泳和SDS-PAGE的组合,即先进行等电聚焦电泳(按照pI分离),然后再进行SDS-PAGE(按照 分子 大小),经 染色 得到的电泳图是个二维分布的 蛋白质 图。 蛋白质组 研究的发展以双向电泳技术作为核心. 双向电泳由O’Farrell’s于1975年首次建立并...
金免疫技术的特点是以胶体金作为标记物。这一技术在70年代初期由Faulk和Taylor始创,最初用于免疫电镜技术。迄今为止,金标记仍主要用于免疫组织化学中。在免疫测定中,金标记常与膜载体配合,形成特定的测定模式,典型的如斑点免疫渗滤试验和斑点免疫层析试验等,已是目前应用广泛的简便、快速检验方法。
发光免疫技术是将发光系统与免疫反应相结合,以检测抗原或抗体的方法。其既具有免疫反应的特异性,更兼有发光反应的高敏感性,在免疫学检验中应用日趋广泛。
蛋白质等生物分子在缓冲液中带负电荷或正电荷,在电场中向阳极或阴极运动,称为电泳。由于其等电点不同,分子大小、形状和荷质比的不同,使不同蛋白质分子具有不同的电泳迁移率,在一定的支持介质中可借以分离各种蛋白质。常用的电泳技术有:醋酸纤维素薄膜电泳、琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、免疫电泳等。
蛋白质等生物分子在缓冲液中带负电荷或正电荷,在电场中向阳极或阴极运动,称为电泳。由于其等电点不同,分子大小、形状和荷质比的不同,使不同蛋白质分子具有不同的电泳迁移率,在一定的支持介质中可借以分离各种蛋白质。常用的电泳技术有:醋酸纤维素薄膜电泳、琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、免疫电泳等。
荧光免疫技术是标记免疫技术中发展最早的一种。很早以来就有一些学者试图将抗体分子与一些示踪物质结合,利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。Coons等于1941年首次采用荧光素进行标记而获得成功。这种以荧光物质标记抗体而进行抗原定位的技术称为荧光抗体技术(fluorescentantibodytechnique)。 由于一般荧光测定中的本底较高等问题...
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