血清蛋白电泳 即用电泳方法测定 血清 中各类 蛋白 占 总蛋白 的百分比。对于肝、肾 疾病 和 多发性骨髓瘤 的诊断有意义。 成分简介 血清含有各种 蛋白质 ,其 等电点 均在pH7.5以下,若置于pH8以上的 缓冲液 电泳时均游离成负离子,再向正极移动。由于其等电点,分子量和 分子 形状各不相同,其电泳速度就不同。故可将血清中蛋白质区分开来。分子量小,带电...
蛋白质电泳 ( 英语: Protein electrophoresis )是根据蛋 白质带 电量或 分子量 的大小把不同的 蛋白质 分开,起到分离 纯化 的效果。根据带电量分离的叫 等电点 电泳 ( 二维电泳 ),根据分子量分的是用 十二烷基硫酸钠 聚丙烯酰胺凝胶电泳 。后者的运用较广泛,与转膜技术, 抗原抗体反应 ,和 成像 技术合起来就是 分子生物学 实...
例如抗IgA血清的纯化方法---免疫吸收法。如分泌型IgA(SIgA)抗原纯度不高,所制的抗血清常与IgG呈交叉反应,为此需要吸收,常采用纯化的人IgG戊二醛聚合物加以吸收纯化。方法如下: 1.人IgG聚合物的制备在5ml含40mg/ml人IgG的0.1mol/l pH7.0磷酸缓冲溶液中,加入2.5%戊二醛溶液1ml,边加边搅,5min即出现混浊,逐现大块...
双向凝胶电泳 的原理是第一向基于 蛋白质 的 等电点 不同用 等电聚焦 分离,第二向则按分子量的不同用SDS-PAGE分离,把复杂 蛋白 混合物中的蛋白质在二维平面上分开。近年来经过多方面改进已成为研究 蛋白质组 的最有使用价值的核心方法。 分离蛋白质组所有蛋白的两个关键参数是其分辨率和可重复性。在目前情况下,双向凝胶电泳的一块胶板(16cm×20cm)可分...
毛细管电泳 (capillary electrophoresis, CE)又叫高效毛细管电泳(HPCE), 是近年来发展最快的分析方法之一。1981年Jorgenson和Lukacs首先提出在75μm内径 毛细管 柱内用高电压进行分离, 创立了现代毛细管电泳。1984年Terabe等建立了 胶束 毛细管电动力学色谱。1987年Hjerten 建立了 毛细管等...
1983年,Holgate等人将IGS与银显影方法相结合创立了免疫金银法(Immunogold—sliver staining, IGSS)IGSS的基本原理是通过免疫反应沉积在抗原位置的胶体金颗粒起着一种催化剂作用,用对苯二酚还原剂将银离子(Ag + )还原成银原子(Ag o )。被还原的银原子于是围绕金颗粒形成一个“银壳”,“银壳”一旦形成本身亦具有催化...
金标法是Faulk和Taylor(1971)提出的,并首先用于免疫电镜。它是利用胶体金在碱性环境中带有负电的性质,使其与抗体相吸附,从而将抗体标记。当用金标记的抗体与抗原反应时,在光镜水平胶金液呈现鲜艳的樱红色,不需加外进行染色。在电镜水平,金颗粒具有很高的电子密度,清晰可辨。因此,免疫电镜胶体金标记法近年来被成功地应用于生物学的各个方面,并取得了要喜的进展...
彩色免疫金银法(coloured IGSS简称CIGSS)是在IGSS基础上发展起来的一种新方法。其基本原理与彩色显影相似。IGSS方法染色在抗原位点处生成银颗粒经铁氰化钾与溴化钾的作用即被氧化成溴化银,后者与彩色显影剂相接触立即被还原成金属银,而彩色显影剂本身则被氧化,其氧化产物使彩色成色剂由无色变成有色的染料并沉积在银颗粒的部位,金属银变成了银离子。由于...
琼脂糖凝胶电泳 是用 琼脂 或 琼脂糖 作支持介质的一种电泳方法。对于分子量较大的样品,如大分子 核酸 、 病毒 等,一般可采用孔径较大的琼脂糖凝胶进行电泳分离。 琼脂糖凝胶约可区分相差100bp的DNA片段,其分辨率虽比 聚丙烯酰胺凝胶 低,但它制备容易,分离范围广,尤其适于分离大片段DNA。普通琼脂糖凝胶分离DNA的范围为0.2-20kb,利用脉冲电泳,...
...双层玻板内,待凝。抗血清效价高时,亦可直接将抗血清混入12.0g/L琼脂中,摇匀后制板。 2.按模式图用直径3mm的金属管打孔,6×12cm免疫扩散板打孔28个,6×8cm免疫扩散板打孔16个。 3.待测血清用硫柳汞盐水稀释(按说明书),用微量加样器每份标本加1孔。加样量10μl。置湿盒(水平位置)37℃扩散24h,测沉淀环直径,如图18-2所示。 图18-...
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