引言中已强调了仅在一定条件下 酶反应 速度v才和酶量成正比例。一定条件是什么?这些条件之间有无主次关系?如何选择合适的测定条件?这些都是实验室工作者在设计或选择测 酶活性 浓度方法时必须面对的问题。 首先可从理论上探讨在什么特定情况下的反应速度才可能与酶量成正比例。酶的整个反应过程可简化如下: 式中Kp可看成为ES的 解离常数 .Michaclis和Ment...
...(6%)、 花生 四烯酸(65)、硬脂酸(3%)等脂肪酸结合而成。血清中胆固醇在LDL中最多,其次是HDL和VLDL,CM最少。血清总胆固醇测定方法分为化学法和酶法两大类。 ⒈化学法化学法一般包括:①抽提;②皂化;③毛 地黄 皂苷沉淀纯化;④显色比色四个阶段。代表性的方法有Sperry-Webb法,包括①到④步骤操作过程,常规操作中多省去了②、③。或者用省去...
...l/L硫代硫酸钠液滴定至溶液呈浅黄色,加0.5% 淀粉指示剂约0.5ml,滴定至蓝色消失,同时做空白。 (空白滴定数-样品滴定数)×硫代硫酸钠mol/L×5.203 样品亚硫酸氢钠含量%(g/ml)=───────────────────── 样品ml数 附注 如测定样品为亚硫酸氢钠液,只需根据其浓度和取样量,在测定时适当增加0.1mol/L碘液的用量即可。
... 浓度很低( 总胆汁酸 2μg/ml),可用气相色谱、放射免疫、 高效液相层析 法及酶学分 析法 (以3α-羟类 胆固醇 脱氢酶 为工具酶)测定NADH生成量。可以测定血清总胆汁酸(TBA),用气相色谱、放射免疫和高效液相层析尚可对 胆酸 、 脱氧胆酸 及 鹅脱氧胆酸 进行分别测定,还可进行胆汁酸负荷试验及尿中 硫酸 结合型胆汁酸的测定。 测定血清胆汁酸可提...
1 试剂 1.1 1mol/L氢氧化钠液 取化学纯氢氧化钠20g,加蒸馏水溶解成500ml。 2 操作 2.1 除蛋白质 方法同蛋白质含量测定。 2.2 蒸馏 精确量取除蛋白质滤液10ml于凯氏蒸馏器内,加1mol/L氢氧化钠1ml,加少量蒸馏水,按半微量定氮法进行蒸馏、滴定。 3 计算 样品硫酸铵含量%(g/ml)=(样品滴定数-空白滴定数)×标准盐酸mo...
早年进行血氧和 二氧化碳 的测定是采用经典的VanSlyke量气法。此法原理是利用皂素破坏 红细胞 ,再用铁氢化钾破坏 血红蛋白 以释放O 2 ,加辛酸去泡剂等混合液,使这一反应过程在 真空 密闭条件下进行,让 血液 中所含CO 2 、O 2 和N 2 全部释放进密封真空管的液面之上,然后测量所释气体的压力。而后又用CO 2 吸收剂 及O 2 吸收剂分别将两...
...氏漏斗快速抽滤。 1.1.2 试剂之SO2含量可控制在28~48mmol/L(SO2含量过多可通空气驱除之,过少可通入SO2)。 SO2含量测定:吸取复红亚硫酸试剂10ml于三角瓶内。加蒸馏水20ml,0.5%淀粉指示剂5ml,用0.1mol/L碘液滴定至呈浅蓝色。 计算:SO2mmol/L=50×碘液ml数×碘液mmol/L 1.2 混合酸 量取蒸馏水78...
除了生理条件可引起酶测定值的变化外,还有其它一些非病理因素也会引起实验室测定结果的变化。 (一)酶测定方法 酶测定方法大致经过三个历史发展阶段,50年代以前大都使用“固定时间法”,即让酶与底物作用一段固定时间,一般为半小时左右,然后停止酶反应,用光电比色测产物生成量或底物消耗量,从而计算出酶催化反应的平均速度。再据此按各作者自己定义的“单位”向临床报告测定结...
...物的TDM除原型药外,还需同时检测具药理活性的代谢物。另一方面,药物的有效浓度范围和中毒水平,是结合大量临床观察确定的,要求任何实验室建立的测定方法应具有高度可比性。下面将仅结合药物测定的特殊要求,对常用临床化学技术作一评估性介绍。 (一)光谱法 多数药物或代谢物本身在紫外光区即存在吸收峰,一些药物或代谢物受激发后,本身即可发射荧光;而另外一些药物还可通过特...
...黄色,加淀粉指示剂约0.5ml,滴定至蓝色消失。同时做空白试验。 2.2 人胎盘血丙种球蛋 白及 疫苗类样品 精密量取除蛋白(方法同蛋白含量测定钨酸除蛋白法)后滤液5ml于碘瓶中,其余操作同2.1项。 2.3 人胎盘组织液 精确量取样品5ml于50ml容量瓶内,加适量蒸馏水,加0.5%酚酞指示剂2滴,加5%硫酸锌溶液2ml,饱和氢氧化钡溶液约2.5ml(加至...
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