...理想的DNA保存方法,特别适用于对形态学、免疫表型和基因改变的相关性分析。2.固定时间对DNA的影响固定过程中所发生的组织反应至今尚未被完全更理解,虽然理论上讲室温下福尔马林与DNA几乎不发生反应,但已发现碱基与组蛋白之间的甲基交联。这种...
...PCR是体外酶促合成特异DNA片段的新方法,主要由高温变性、低温退火和适温延伸三个步骤反复的热循环构成:即在高温(95℃)下,待扩增的靶DNA双链受热变性成为两条单链DNA模板;而后在低温(37~55℃)情况下,两条人工合成的寡核苷酸引物...
...的PCR反应称为反转录PCR,简称RT-PCR。把由RNA转化成DNA的过程叫做反转录,反转录需要在反转录酶的作用下完成。四、PCR反应的基本条件及其对PCR的影响(一)模板核酸PCR可以以DNA或RNA为模板进行核酸的体外扩增。不过RNA...
...锚定PCR(AnchoredPCR, A-PCR)主要用于分析具有可变末端的DNA序列,Loh等用A-PCR对人外周血淋巴细胞T细胞受体α-链的mRNA的多变性进行了分析。先合成cDNA,并用末端脱氧核苷酸转移酶在其3’-可变区末端加上...
...抗原结合量有关,如果用标准反应作对照,则可以对抗原的量进行估算。因此,通过改变连接物的浓度就可以改变检测系统的灵敏性。其它因素,如抗体的浓度,PCR循环周期数,PCR产物的检测方法等也同样影响系统的灵敏性。二、转录依赖的扩增系统(...
...合成任何DNA片段。如果合成的DNA片段不是所预期的或除了有所预期的片段还有其它的DNA片段,那么可以考虑对PCR的条件进行某些改进,看是否能改善其特异性,否则要另选引物。表6-20 用于HIV PCR扩增的引物及探针引物及探针序列(5′3...
...聚合酶链反应(polymerase chainreaction,PCR)用于Hp研究创造了条件。本文就近年有关PCR在Hp研究中的应用作一综述。1 PCR原理PCR是近年发展起来的一种体外扩增特DNA片段的技术,有关它的原理许多文献已有详细...
...聚合酶链反应(polymerase chainreaction,PCR)用于Hp研究创造了条件。本文就近年有关PCR在Hp研究中的应用作一综述。1 PCR原理PCR是近年发展起来的一种体外扩增特DNA片段的技术,有关它的原理许多文献已有详细...
...℃的半衰期从Taq DNA聚合酶的5~6min提高到20min,同时该酶片段也对两个或更多模板位点的扩增反应即复合PCR(Multiplex PCR)更为有利。VentTMDNA多聚酶:是美国New England Biolabs公司从...
...PCR技术以惊人的速度在研究与诊断领域得到应用,限于篇幅所限,在此不一一进行讨论了。本章 重点讨论了PCR技术发展的有关内容,尤为影响PCR的主要因素和PCR的各种反应模式及新进展,以求大家在实际工作中能够注意到这些问题,并有所创新,相信...
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