(一) DNA 损伤的原因 1.DNA 分子 的自发性损伤 (1)DNA复制中的错误 以DNA为模板按 碱基配对 进行DNA复制是一个严格而精确的事件，但也不是完全不发生错误的。碱基配对的错误频率约为10-1－10-2，在DNA 复制酶 的作用下 碱基 错误配对频率降到约10-5-10-6，复制过程中如有错误的 核苷酸 参入，DNA 聚合酶 还会暂停催化作用...
DNA变性是指双螺旋之间氢键断裂，双螺旋解开，形成单链无规则线团，因而发生性质改变（如粘度下降，沉降速度增加，浮力上升，紫外吸收增加等），称为DNA变性。加热、改变DNA溶液的pH、或受有机溶剂（如乙醇、尿素、甲酰胺及丙酰胺等）等理化因素的影响，均可使DNA变性。 通常，可利用DNA变性后波长260nm处紫外吸收的变化追踪变性过程。因为DNA在260nm处有...
脱氧核糖核酸(DNA)是生物界遗传的主要物质基础。生物有机体的遗传特征以密码(code)的形式编码在DNA分子上，表现为特定的核苷酸排列顺序-即遗传信息，在细胞分裂前通过DNA的复制(Replication)，将遗传信息由亲代传递给子代，在后代的个体发育过程中，遗传信息自DNA转录(Transcription)给RNA，并指导蛋白质合成，以执行各种生命功能，...
(一) DNA 的 二级结构 双 螺旋结构 模型(double helixmodel) 1953年，Watson和Crick提出了著名的DNA 分子 的双螺旋结构模型，揭示了 遗传信息 是如何储存在DNA分子中，以及遗传性状何以在世代间得以保持。这是 生物学 发展的重大里程碑。 在DNA双螺旋结构模型建立之前，早在1868年，Miescher已经从 脓细胞...
DNA 存储着生物体赖以生存和繁衍的 遗传信息 ，因此维护DNA 分子 的完整性对 细胞 至关重要。外界环境和生物体内部的因素都经常会导致DNA分子的损伤或改变，而且与 RNA 及 蛋白质 可以在胞内大量合成不同，一般在一个 原核细胞 中只有一份DNA，在 真核 二倍体细胞 中相同的DNA也只有一对，如果DNA的损伤或遗传信息的改变不能更正，对 体细胞 就可...
脱氧核糖核酸(DNA)是生物界遗传的主要物质基础。生物有机体的遗传特征以密码(code)的形式编码在DNA分子上，表现为特定的核苷酸排列顺序-即遗传信息，在细胞分裂前通过DNA的复制(Replication)，将遗传信息由亲代传递给子代，在后代的个体发育过程中，遗传信息自DNA转录(Transcription)给RNA，并指导蛋白质合成，以执行各种生命功能，...
一、DNA变性
DNA 做为遗传物质的基本特点就是在 细胞 分裂前进行准确地自我复制(selfreplication)，使DNA的量成倍增加，这是细胞分裂的物质基础。1953年Watson和Crick提出DNA双 螺旋结构 模型指出，DNA是由二条互补的 脱氧核苷 酸链组成，所以一条DNA链上的 核苷酸 排列顺序是由图16-1双螺旋DNA的复制另一条决定的。这就说明DNA...
(一) DNA 复制的起始点 很多实验都证明：复制是从DNA 分子 上的特定部位开始的，这一部位叫做复制起始点(originof replication)常用ori或o表示。 细胞 中的DNA复制一经开始就会连续复制下去，直至完成细胞中全部 基因组 DNA的复制。DNA复制从起始点开始直到终点为止，每个这样的DNA单位称为 复制子 或复制单元(replico...
（一）DNA的酶切与连接 （1）酶切反应 同质粒DNA的鉴定，只不过是质粒DNA换为载体DNA。若大量酶切，则成比例增加。 （2）加2倍体积的预冷无水乙醇和1/10体积的3mol/l NaAc混匀，-20℃2h以上。 （3）15000rpm离心15min，弃上清。 （4）加入75%乙醇洗涤2次，离心弃上清，真空抽干。 （5）加入适量1×TE溶解。如此可得线性...
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