DNA, 即 脱氧核糖核酸 (Deoxyribonucleic acid)是一种分子,核酸的一类,因分子中含有脱氧核糖而得名。DNA是 染色体 的主要化学成分。DNA可组成 遗传 指令,以引导生物发育与生命机能运作。主要功能是长期性的资讯储存,可比喻为生物发育和运作的“蓝图”。带有遗传讯息的DNA片段称为 基因 ,其他的DNA序列,有些直接以自身构造发挥作用...
DNA, 即 脱氧核糖核酸 (Deoxyribonucleic acid)是一种分子,核酸的一类,因分子中含有脱氧核糖而得名。DNA是 染色体 的主要化学成分。DNA可组成 遗传 指令,以引导生物发育与生命机能运作。主要功能是长期性的资讯储存,可比喻为生物发育和运作的“蓝图”。带有遗传讯息的DNA片段称为 基因 ,其他的DNA序列,有些直接以自身构造发挥作用...
...(pH7.5)、10mmol/l Mg-Cl 2 、10mmol/L β-巯基乙醇和500μg BSA/ml,引物片段1和2各90ng,模板DNA0.1μg,[α- 32 P]dCTp 1.5×10 6 Bq,dATp 、dGTP和dTTP各200μmol/L。标记反应包括3个步骤: (1)变性:反应管在95℃水浴5min,然后离心; (2)退火:37℃水浴...
基因探针根据标记方法不同可粗分为放射性探针和非放射性探针两大类,根据探针的核酸性质不同又可分为DNA探针,RNA探针,cDNA探针,cRNA探针及寡核苷酸探针等几类,DNA探针还有单链和双链之分。下面分别介绍这几种探针。
基因 的复制的以 DNA 复制为基础的。生物体的 遗传 特征表现为特定的 核苷酸 顺序,并以 密码子 的形式编码在DNA 分子 上。在 细胞 分裂过程中,通过DNA准确地自体复制(self-replication),把 遗传信息 从 亲代 传给 子代 ,这样,DNA就能真正完成其作为遗传信息载体的使命,从而保证遗传物质的连续性和相对的稳定性。 由于DNA分子...
...合方式,是核酸的重要理化特性。利用分子杂交这一特性来对特定核酸序列进行检测,必须将杂交链中的一条用某种可以检测的进行标记,这条链就称为核酸 探针 。因此,核酸探针的制备是分子杂交技术的关键。 放射性同位素 标记是最早采用的也是目前最常用的核酸探针标记方法。常用的放射性同位素有32P和35S。32P因其能量高,信号强,所以最常用。放射性同位素标记探针虽然敏感度...
(一)DNA探针 DNA探针是最常用的核酸探针,指长度在几百碱基对以上的双链DNA或单链DNA探针。现已获的DNA探针种类很多,有细菌、病毒、原虫、真菌、动物和 人类 细胞DNA探针,这类探针多为某一基因的全部或部分序列,或某一非编码序列。这些DNA片段须是特异的,如细菌的毒力因子基因探针和人类ALU探针,这些DNA探针的获得有赖于分子克隆技术的发展和应用。...
利用寡核苷酸自动合成仪,可很简单地合成制备寡核苷酸探针(如15~50bp),这类探针具有以下优点:①短的探针比长探针杂交速度快,特异性强。②可以在短时间内大量制备。③在合成中进行标记制成探针。④可合成单链探针,避免了用双链DNA探针在杂交中自我复性,提高杂交效率。⑤寡核苷酸探针可以检测小DNA片段,在严格的杂交条件下,可用于检测在序列中单碱基对的错配。 因此...
...近年来国内外已将HLA分型技术由 抗原 水平发展到 基因 水平。 (一)限制性片段长度 多态性 检测技术 这是首先建立的对多态性进行检测的 DNA 分析技术。个体间抗原特异性来自 氨基酸 顺序的差别,后者由编码基因的 碱基顺序 不同所决定。这种碱基顺序的差别造成 限制性内切酶 识位置及 酶切位点 数目的不同,从而产生数量和长度不一的DNA酶切片段。用特异性 ...
DNA 作为遗传物质的基本特点就是能够准确地自我复制,而DNA的互补双 螺旋结构 对于维持这类遗传物质的稳定性和复制的准确性都是极为重要的。 (一)DNA复制的方式 从前面的内容可知,DNA是由两条互补的 多核苷酸 链组成的,其中一条链上的 核苷酸 排列顺序可以决定另一条链上的核苷酸顺序。据此推测,在复制过程中,首先DNA双螺旋的两条多核苷酸链之间氢键断裂,...
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