...(1)1mm厚组织块,在4℃下用固定液固定后,置于含4.5%的蔗糖PBS(0.05mol/l pH7.2),4℃中漂洗,换数次固定液,过夜。(2)随后,作10~40μm的冰冻切片,放入第一抗体血清作用12~18h,4℃,用含蔗糖的PBS洗...
...LTris20mmol/LEDTA10mmoo/LNaCl1%SDS500μg/ml蛋白酶K PH8.05μm组织切片↓常规脱蜡、水化↓第一次溶液A孵育(去上清)↓第二次溶液A孵育(留上清)↓氯仿-异戊醇抽提↓RNA酶和蛋白酶消化↓酚抽提↓沉淀...
...表12-78 兔与猫各肠段长度比较[29]肠段名称兔猫长度(厘米)%长度(厘米)%十二脂肠509.5168.1空 肠2264314573.2回 肠366.973.5盲 肠6312结 肠115.5223015.2直 肠34.56.6总长度...
...病人DNA同时用限制性内切酶切成片段,经电泳分离、印迹、探针杂交等找到目的基因。由于患者基因的缺失或插入,造成被限制性内切酶切开的片段(分子量)大小与正常人发生差异(限制性片段长度多态),使其电泳迁移率发生差异,而达到基因诊断的目的。小区域...
...min~1h,原位用环氧树脂包埋,光镜作半薄切片定位,作超薄切片。2.组织切片酶标记抗体染色法(1)1mm厚组织块,在4℃下用固定液固定后,置于含4.5%的蔗糖PBS(0.05mol/l pH7.2),4℃中漂洗,换数次固定液,过夜。(2)随后...
...的用量。2.染色步骤 主要程序如图4-4图4-4 酶桥法主要染色步骤(1)切片准备及第一抗体孵育前处理同间接法,第一抗体(假设来自种属A)孵育24h(4℃)。第一抗体的稀释度可高些,使抗体的两个Fab段均与组织抗原结合,较牢固,漂洗时不易...
...分型技术由抗原水平发展到基因水平。(一)限制性片段长度多态性检测技术这是首先建立的对多态性进行检测的DNA分析技术。个体间抗原特异性来自氨基酸顺序的差别,后者由编码基因的碱基顺序不同所决定。这种碱基顺序的差别造成限制性内切酶识位置及酶切位点数...
...基因工程的基本技术是人工进行基因的剪切、拼接、组合。基因是一段具有一定功能的DNA分子,要把不同基因的DNA线形分子片段准确地切出来,需要各种限制性核酸内切酶(restriction endonuclease);要把不同片段连接起来,需要...
...抗体,进行组织细胞内抗原或半抗原的定位,开辟了酶标抗体技术免疫酶细胞化学之路。Sternberger(1970)等人在此基础上又作了改良,建立了非标记抗体酶法以及PAP法。酶标抗体法确立至今已经27个春秋,不断发展、成熟。各种新技术的引入,使...
...医学和生理学奖。免疫遗传学发展简史参见表6-1。目前免疫遗传学的研究已深入到基因和分子的水平。WHO在上海设立了免疫遗传培训中心,我国从70年代初开始了对我国不同民族、地区HLA抗原频率调查,组织配型和脏器移植,HLA和疾病的相关性以及某些...
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