...加入Taq DNA聚合酶0.5~2u,在旋涡混合器上混匀简单离心一下,加入35μl石蜡油。放入65℃水浴2min,取出,立即进入PCR循环:91℃变性30s,51。C退火1min,68℃延伸2min。重复上述过程15次。最后将反应管置65℃...
...PCR)的发展和应用。应用PCR技术可以使特定的基因或DNA片段在短短的2-3小时内体外扩增数十万至百万倍。扩增的片段可以直接通过电泳观察,也可用于进一步的分析。这样,少量的单拷贝基因不需通过同位素提高其敏感性来观察,而通过扩增至百万倍后直接...
...EcoRI(R)和Hind(H)的酶切位点。SharpD等早期报道,人MTp cDNA 5'端非编码区有64个核苷酸。用锚定PCR检测MTpcDNA的5'末端,从两个独立PCR产物的直接序列分析揭示,从翻译起始的上游有86bp的非编码序列(见图7-...
...。可能的原因是DNA直接或间接的化学改变使某些限制性酶切位点失活和/或单链DNA存在。(5)由于小片段DNA的存在,故用作杂交分析的DNA量应适当增加,以增强杂交信号。3.PCR分析PCR技术是近年来分子生物学技术的典范,已被广泛地用于分子...
...)和彩色PCR 七、加端PCR 八、锚定PCR或固定PCR 九、玻片PCR 十、反转录PCR方法检测RNA 十一、定量PCR 第六节 样品处理与注意事项 一、样品处理 二、注意事项 第七节 PCR仪器的发展 第八节 PCR临床应用领域及特点...
...复合PCR(Multiplex PCR) 四、反向PCR(Inverse PCR或Reverse PCR) 五、不对称PCR(Asymmetric PCR) 六、标记PCR(LP-PCR)和彩色PCR 七、加端PCR 八、锚定PCR或固定...
...阴性患儿同时用PCR法检测胃液Hp,结果均为阴性。2 讨论自从Warren和Marshall于1983年首先从胃炎患者中分离出Hp以来,现已肯定它与慢性胃炎,消化性溃疡发病的关系。Hp感染广泛存在于世界,Hp的传播方式为粪—口或口—口传播,...
...阴性患儿同时用PCR法检测胃液Hp,结果均为阴性。2 讨论自从Warren和Marshall于1983年首先从胃炎患者中分离出Hp以来,现已肯定它与慢性胃炎,消化性溃疡发病的关系。Hp感染广泛存在于世界,Hp的传播方式为粪—口或口—口传播,...
...DNA在硝酸纤维素膜上的固定。硝酸纤维素滤膜(孔径0.45um)先在蒸馏水中充分浸泡,再用6SSC浸泡30min~2h,凉干,DNA样品转移或加至硝酸纤维素膜上后,先室温干燥4h,然后再在80℃真空干燥2h。3.预杂交。湿润的滤膜放入可加热封口...
所有搜索结果仅供参考,如需解决具体问题请咨询相关领域专业人士。