...和AⅡ大部分分布在HDL中,是HDL的主要载脂蛋白。1.ApoAⅠApoAⅠ是ApoA族最多的一种组份,先后从人HDL中分离纯化得到ApoAⅠ,并阐明了ApoAⅠ的氨基酸序列,也预测了其二级结构的要点。人成熟的ApoAⅠ由243个氨基酸残基...
...载脂蛋白分离纯化后,获得了所需要的纯品,该纯品纯度及其品种可通过下述方法进行鉴定。一、免疫电泳法免疫电泳法既可用于鉴定蛋白种类,又可鉴定其纯度。制备1%的琼脂糖,以0.1mmol/L巴比妥缓冲液(0.05μ,pH8.6)为溶剂,制作一块约...
...有缺陷的。Alaupovic提出将载脂蛋白组成作为鉴定脂蛋白颗粒的标志及脂蛋白分类的基础。每个脂蛋白颗粒只含一种载脂蛋白称为单脂蛋白,如LDL中多数脂蛋白只含ApoB100,称为脂蛋白B(LpB);若含有二种或二种以上不可分离的载脂蛋白叫复...
...上述各种方法制备酶标抗体时,除产生酶标抗体外,还有未标记的抗体蛋白、游离酶、酶二聚体及偶联剂等。这些均可使酶标抗体的敏感性下降,故酶标抗体须经纯化后应用。现简介几种常用的纯化方法。1.多聚体的分离实验中,不同的试剂形成的多聚体的数量各异,...
...载脂蛋白基因的分离是通过用相应的cDNA作为探针筛选基因文库而完成的。比较基因的核苷酸序列与cDNA的核苷酸序列得以鉴定基因的内含子与外显子数目以及它们的分界线。大部分真核细胞的基因含有内含子,内含子不编码氨基酸,但有些内含子参与基因表达...
...置于已准备好的不同密度梯度的盐溶媒介质中,在强大离心作用下,各脂蛋白依其自身的Sf不同,分散于离心管中的密度梯度溶媒层,达到分离纯化的目的。超速离心法是分离纯化脂蛋白的有效技术,目前广泛应用于脂蛋白、载脂蛋白代谢的研究中。⒉电泳分离法不同...
...PK的活性峰集中在3、4号峰上。用丙酮沉淀后,效价近300单位/毫克,这为制备高纯度的PK提供了可能。同时,其他蛋白质峰的峰形也保持很好,从而有助于实现在分离PK的同时分离出其他有用的蛋白酶,实现多酶联产。 在该工艺流程中,上样量与树脂体积...
...1.周新,张华征,殷以礼等.抗人载脂蛋白B血清的制备及其临床应用.中华心血管病杂志,1986,14:135~1372.周新,张华征,韩豫.人血清载脂蛋白C的分离与定量.科学通报,1984,29:437~4403.周新,付湘微,贺小玲等,...
...称为IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。载脂蛋白抗体以IgG最为稳定。因载脂蛋白的体液中含量不同以及分离纯化的难易的差别,可分别采用多克隆抗体制备法和单克隆抗体制备法。1.多克隆抗体的制备(1)抗原目前所知的载脂蛋白进入异种机体后,能...
...较为清楚。大部分载脂蛋白的基因和cDNA都已得到分离和确定,其核苷酸顺序也进行了测定。除ApoAⅣ,B、(a)外,它们的共同特点是含有三个内含子(intron)和四个外显子(exon),其内含子插入外显子的位置大致相同,基本上按照生理功能的...
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