...试剂盒还应包括抗原参照品,相应的检测抗体的试剂盒应有阳性对照品。3.测定操作以双抗体夹心法为例,具体步骤如下:(1)将反应板平放于实验台上,于小孔内滴加血清标本1~2滴,待完全渗入。(2)于小孔内滴加免疫金复合物试剂1~2滴,待完全渗入。(3)...
...蛋白质、糖蛋白、脂蛋白、细菌毒素、酶、补体等皆为良好的可溶抗原。但因这些蛋白质多为复杂的蛋白组分,免疫前需进行纯化。蛋白质纯化方法在生物化学技术中已有详述,本章主要介绍免疫化学纯化方法。(一)组织和细胞粗抗原的制备免疫原多来源于只类及动物...
...免疫复合物:阴性。(酶联免疫吸附测定) HBsAg免疫复合物:<1:16.(聚乙二醇沉淀胃蛋白解离法测定) 阳性: 提示机体对乙型肝炎病毒的反应。但在某些情况下可造成免疫性肝细胞病理损伤,HBsAg免疫复合物大量沉积于血管、肾脏等组织,可...
...导致假阳性,用白蛋白或封闭性阻断等预先孵育切片,可封闭之。5.疏水键和离子键免疫球蛋白可通过疏水键或离子键与组织中的碱性蛋白或Fc受体(冰冻切片Fc受体保存尤佳)非特异性结合。用正常血清(制备第二抗体种属的血清为首选),于第一抗体前孵育切片,...
...测定。现有羊抗人ApoAⅠ、AⅡ、B100、CⅡ、CⅢ、E和(a)等抗体试剂。测定原理是将某一特异抗体加到待测人血清中,即与血清中相应抗原形成抗原抗体复合物,根据复合物的量,即可测出血清中某一Apo含量。例如在人血清中加入抗人ApoAⅠ抗体...
...结合在金颗粒的表面,形成一个蛋白层,阻止了胶体金颗粒的相互接触,而使胶体金处于稳定状态,如果=低于蛋白质的等电点时,蛋白质带正电荷,胶体金带负电荷,二者极易静电结合形成大的聚合物。如果pH高于蛋白质等电点时,蛋白质带负电荷,与金颗粒的负电荷...
...抗原免疫动物产生的抗体是血清γ-球蛋白的一部分。抗体的理化性质及结构与γ-球蛋白相近似。γ-球蛋白是一组结构相似,但又有差异的蛋白质,通称为免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig),按其结构和免疫化学性质的差异,又可分为五类,分别...
...单克隆抗体纯化方法为亲和纯化法,多用葡萄球菌A蛋白或抗小鼠球蛋白抗体与载体(最常用Sepharose)交联,制备亲和层析柱将抗体结合后洗脱,回收率可达90%以上。蛋白可与IgG1、IgG2a、IgG2b和IgG3结合,同时还结合少量的IgM。...
...从方差分析结果可知, 因素B 对丸重变异系数、溶散时限及外观质量影响最大, 而其他因素影响较小。选择指标中两个或两个以上均为较佳的工艺条件, 得优选工艺为A2B3C3, 即基质中PEG—4000 ∶6000 为1∶1, 基质与药物比例为4∶...
...2.6μl上述SPDP甲醇液,SPDP:蛋白=9.5,22℃,40min ,加入25μmol/L二硫苏糖醇(DTT)pH7.4缓冲液,22℃,25min,同上过Sephadex G-50,收集蛋白A峰。(3)取0.77mg/ml的PE和...
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