制备单克隆抗体是复杂而费时的工作,整个技术流程如图11-2。 (一)抗原提纯与动物免疫 对抗原的要求是纯度越高越好,尤其是初次免疫所用的抗原。如为细胞抗原,可取1×10 7 个细胞作腹腔免疫。可溶性抗原需加完全福氏佐剂并经充分乳化,如为聚丙烯酰胺电泳纯化的抗原,可将抗原所在的电泳条带切下,研磨后直接用以动物免疫。 选择与所用骨髓瘤细胞同源的BALB/c健康小...
在不同的肾脏疾病时,荧光标记抗体或免疫酶标记抗体在肾脏内显示的部位、分布情况和型式(pattern)皆有所不同。现根据其在肾脏内显示的不同部位叙述如下:
在不同的肾脏疾病时,荧光标记抗体或免疫酶标记抗体在肾脏内显示的部位、分布情况和型式(pattern)皆有所不同。现根据其在肾脏内显示的不同部位叙述如下:
...集素是否被吸附在滤器中,然后上述结合物经过该微孔滤过器过滤到一个无菌瓶中。 ③加入叠氮钠,浓度1:1000,保存于4℃C备用。 2.抗凝集素抗体的制备 抗凝集素抗体的制备法与一般免疫血清制备大致相同(见第二章 )。所不同的是:①凝集素具有较强的毒性,易使被免疫动物发病或甚至死亡。解决的方法是经处理使凝集素变性,从而减低其毒性,但同时要保证其抗原性不受或少受破...
对制备的荧光抗体必须进行质量鉴定,主要进行特异性和敏感性两个方面的鉴定。
...pylori,Hp),并报道和B型胃炎及 消化性溃疡 密切相关。目前鉴定和诊断Hp感染有许多方法,但受种种因素制约,但结果受到一定影响。目前制备抗Hp单克隆抗体(Hp-mAb)的资料不多,Hp-mAb免疫过氧化物酶染色检测胃粘膜活检标本,国内未见报道。我们成功地制备了Hp-mAb,对其特性进行了一系列鉴定,并应用于临床检测,现报告如下。 1 材料和方法 1....
(一)抗体的荧光素标记 用于标记的抗体,要求是高特异性和高亲和力的。所用抗血清中不应含有针对标本中正常组织的抗体。一般需经纯化提取IgG后再作标记。作为标记的荧光素应符合以下要求:①应具有能与蛋白质分子形成共价健的化学基团,与蛋白质结合后不易解离,而未结合的色素及其降解产物易于清除。②荧光效率高,与蛋白质结合后,仍能保持较高的荧光效率。③荧光色泽与背景组织的...
...pylori,Hp),并报道和B型胃炎及 消化性溃疡 密切相关。目前鉴定和诊断Hp感染有许多方法,但受种种因素制约,但结果受到一定影响。目前制备抗Hp单克隆抗体(Hp-mAb)的资料不多,Hp-mAb免疫过氧化物酶染色检测胃粘膜活检标本,国内未见报道。我们成功地制备了Hp-mAb,对其特性进行了一系列鉴定,并应用于临床检测,现报告如下。 1 材料和方法 1....
...pylori,Hp),并报道和B型胃炎及 消化性溃疡 密切相关。目前鉴定和诊断Hp感染有许多方法,但受种种因素制约,但结果受到一定影响。目前制备抗Hp单克隆抗体(Hp-mAb)的资料不多,Hp-mAb免疫过氧化物酶染色检测胃粘膜活检标本,国内未见报道。我们成功地制备了Hp-mAb,对其特性进行了一系列鉴定,并应用于临床检测,现报告如下。 1 材料和方法 1....
先测定荧光抗体特异性染色与非特异性染色的效价,若二者效价相差较大,则可将荧光抗体稀释至一临界浓度,使特异性染色呈阳性,而使非特异性染色保持阴性,稀释方法和染色效价测定方法相同。
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