结核分枝杆菌属于 分支杆菌 ,是引发 结核病 的一种 细菌 . 涂片染色具有抗酸性,亦称 抗酸杆菌 。对外抵抗力强,在阴湿处能生存5个小时有以上,但在烈日曝晒下2小时,5-12%来苏水接触2-12小时,70%酒精接触2分钟,或煮沸1分钟,能被杀死。而最简单的 杀菌 方法是将痰吐在纸上直接烧掉。 感染途径 结核菌主要通过呼吸道传播。传染源主要是排菌的肺结核病人...
(一)模板核酸 PCR可以以DNA或RNA为模板进行核酸的体外扩增。不过RNA的扩增首先逆转录成cDNA后才能进行PCR循环。不同来源的核酸标本必须经处理后才能用于PCR的扩增,处理不当或处理过程中DNA掉失都会导致PCR扩增失败。采集标本方法不当,未能获得所要检测的靶DNA都会导致出现假阴性。但是如果待扩增标本中模板DNA浓度太高也会导致扩增失败。 (二)...
(一)特异性高:首次报导的PCR所用的DNA聚合酶是大肠杆菌的DNAPolymeraseI的Klenow大片段,其酶活性在90℃会变性失活,需每次PCR循环都要重新加入Klenow大片段,同时引物是在37℃延伸(聚合)易产生模板—引物之间的碱基错配、致特异性较差,1988年Saiki等从 温泉水 中分离到的水生嗜热杆菌中提取的热稳定的Taq DNA聚合酶,在...
(一)试剂 (1)引物:决定扩增的特异性。根据检测的DNA不同,选用不同引物,每种病原微生 物都有自己特异的引物。 (2)耐热的DNA聚合酶:此酶是从耐热细菌中分离出来的,能耐受高温90℃-100℃。 (3)10×PCR缓冲液:500mmol/l KCl;100mmol/LTris-HCl(pH8.4,20℃)150mmol/L MgCl2,1mg/ml 明...
RNA的多聚酶链式反应(RT-PCR)是以RNA为模板,联合逆转录反应(reverse transcrip-tion, RT)与PCR,可用于检测单个细胞或少数细胞中少于10个拷贝的特异DNA,为RNA病毒检测提供了方便;并为获得与扩增特定的RNA互补的cDNA提供了一条极为有利和有效的途径。 RNA扩增包括两个步骤:①在单引物的介导下和逆转录酶的催化下,合...
非结核性分枝杆菌(nontuberculous mycobacteria,NTM)系指 分枝杆菌 属中,除 结核分枝杆菌 复合群(人型、牛型、非洲型和田鼠型结核分枝杆菌)和 麻风分枝杆菌 以外的分枝杆菌,由NTM引起的 疾病 称为 非结核性分枝杆菌病 (disease caused by NTM)。近年来由于检出率逐渐增多,相应的对其引起的各种疾病的认识也在...
梅毒螺旋体 不能进行体外培养。检测临床 标本 中梅毒螺旋体最敏感、可靠的方法是兔 感染 试验(RIT),RIT能证实活的梅毒螺旋体存在,是检测梅毒螺旋体常用的标准方法。然而用RIT对 新生儿 或成人 梅毒 进行常规诊断不切合实际。梅毒的 血清学诊断 对确定感染及治疗很有意义,但对 早期梅毒 诊断不敏感,对先天性及 神经 性梅毒的诊断不够特异。 血清学 试验用...
非结核分枝杆菌(nontuberculoaus mycobacteria,NTM)病指除人型、牛型 结核杆菌 及 麻风杆菌 以外的 分枝杆菌 感染 所引起的肺部和肺外 疾病 ,随着 HIV感染 和 AIDS 的流行, 非结核分枝杆菌病 亦见增多。其 组织病理学 表现类似 结核病 ,即 渗出 性病变、 增殖 性病变和 硬化 性病变。 非结核分枝杆菌病的病因 (...
幽门螺杆菌(Hp)感染在人群中广泛存在,Hp的分型鉴定对其感染的临床及流行病学研究具有重要意义。国外文献报道的几种基因型技术使Hp的分型鉴定成为可能,而PCR及单链构象多态性(Signle-strand conformationpolymorphisms,SSCP)分析在菌株分型鉴定中的应用则尚未见报道。作者采用PCR-SSCP分析区分不同来源的Hp,并探讨...
PCR 扩增 DNA 的原理是:先将含有所需扩增分析序列的靶DNA双链经热变性处理解开为两个 寡聚 核苷酸 单链 ,然后加入一对根据已知DNA序列由人工合成的与所扩增的DNA两端邻近序列互补的寡聚核苷酸片段作为 引物 ,即左右引物。此引物范围就在包括所欲扩增的DNA片段,一般需20-30个 碱基对 ,过少则难保持与DNA单链的结合。引物与互补DNA结合后,以...
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