...中药复方是中医临床治疗的主要形式,然而中药复方制剂“粗、大、黑”问题严重制约了其发展。探索行之有效的纯化方法为中药新药研发的关键技术之一。大孔树脂(以下简称树脂)吸附分离技术是20世纪60年代末发展起来的分离新技术,该技术以树脂为工具,可...
...min终止反应。J.摄相。说明:上述各反应均在室温下进行,除了显色反应外,均需振荡或搅拌。(五)排除实验中问题的方法1.DNA不能有效地被标记时考虑(1)用酚/氯仿抽提和/或乙醇沉淀,重新纯化DNA。(2)标记反应的保温时间延长(增至20h)...
...ELISA的主要试剂为固相的抗原或抗体、酶标记的抗原或抗体和与标记酶直接关联的酶反应底物。以下叙述这些试剂的原料和制备方法。(一)固相载体可作ELISA中载体的物质很多,最常用的是聚苯乙烯。聚苯乙烯具有较强的吸附蛋白质的性能,抗体或蛋白质...
...用荧光素、同位素或酶标记抗体或抗原,用于抗原或抗体检测是目前广泛应用的敏感、可靠的方法。上述三种常用的标记物与抗原或抗体化学连接之后不改变后者的免疫特性。本方法可用于定性、定量或定位检测。1.免疫荧光技术 免疫荧光技术(...
...信号转导是目前分子免疫学中研究的热点。免疫学中所涉及的信号转导主要包括淋巴细胞的信号转导以及细胞因子/细胞因子受体的信号转导,其研究手段多种多样,包括细胞生物学、分子生物学以及蛋白质化学等技术。本节将扼要介绍目前信号转导研究中常用的方法和...
...1986)。1989年日本学者Seno等在抗体分子上标记了胶体铁,将胶体铁引入免疫细胞化学技术(Seno,et al. 1989)。杨守京等在胶体的制备方法及其标记物的纯化等方面做了改进,成功地用于流行性出血热病毒抗原的检测(杨守京,等,...
...放射性。但此法只能用于标记含酪氨酸的化合物。此外,含酪氨酸的残基如具有蛋白质的特异性和生物活性,则该活性易因标记而受损伤。间接标记法(又称连接法)是以125I标记在载体上,纯化后再与蛋白质结合。由于操作较复杂,标记蛋白质的比放射性显著低于直接...
...铁蛋白的完整性和纯度。商品制备的铁蛋白是用2%硫酸铵溶液稀释的1%~2%溶液(pH5.85)。为了在应用中得到满意的结果,应用前必须将商品制备的铁蛋白进一步纯化。纯化的方法是用0.1n NaOH或0.1n HCl调整pH值至5.85,然后加入...
...自身凝血酶III)。现有的PCC分离纯化方法主要为直接从血浆中用凝胶吸附和低温乙醇沉析并经凝胶吸附,其中直接从血浆中用凝胶吸附的方法又分为经典的批式吸附法和半流动吸附法。由于血浆中抑制凝血因子活化的一些天然抑制剂会被乙醇所灭活,从而使...
...化学发光标记免疫测定亦称化学发光免疫测定(chemiluminescentimmunoassay,CLIA),是用化学发光剂直接标记抗原或抗体的一类免疫测定方法。用作标记的化学发光剂应符合以下几个条件:①能参与化学发光反应;②与抗原或抗体...
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