...双链过程称为退火或复性。用分子杂交进行定性或定量分析的最有效方法是将一种核酸单链用同位素标记成为探针,再与另一种核酸单链进行分子杂交。(三)探针——靶分子反应从化学和生物学意义上理解,探针是一种分子,它带有供反应后检测的合适标记物,并与特异靶...
...王伯沄,李玉松.核酸探针标记和检测技术的进展.中华流行病学杂志,1997;18(3A):37~429.张立农,等.半抗原Digoxingenin 标记HBv DNA探针的制备及临床应用.中国人兽共患病杂志,1990;6(3):9~1210....
...探针制备就是目的基因的标记,核酸标记方法常用的有缺口平移法、随机引物法、末端标记法等。标记物质有放射性元素(如32P等)和非放射性物质(如生物素、地高辛等)。32P是最常用的核苷酸标记同位素,被标记的dNTP本身就带有磷酸基团,便于标记,...
...核仁中。与此同时,Buongiorno – Nardelli和Amaldi,John及其同事等相继利用同位素标记核酸探针进行了细胞或组织的基因定位,从而创造了原位杂交细胞或组织化学技术。Orth(1970)应用3H标记的兔乳头状瘤病毒cRNA...
...光敏DNP由一连接臂组成,一端是2,4-二硝基苯,另一端有芳基叠氮化合物。此法适用于含氨基检测基团。其敏感性和光敏生物素标记探针相同,检测时需要抗DNP抗体和免疫化学显色。标记方法:(1)DNA不心变性,必须溶于水中,取2~10μg10μ...
...在细胞遗传学(Cytogenetics),生前诊断(Prenatal diagnosis),肿瘤和传染性疾病的诊断,生物学剂量测定(biological dosimetry)和病毒学的病原学诊断等。随着核酸探针的制备,标记方法和基本操作方法...
...hybridisa-tion , FISH)的应用在细胞培养和染色体铺片(见二十一章 )中较为广泛。FISH属于非放射性标记,其优点在于简便,快速,其敏感性可与放射性同位素标记核酸探针相等。不少实验室报告应用FISH(2~5kbp探针)可成功地达到...
...◦ (三)RNA探针 ◦ (四)寡核酸探针 四、核酸探针的标记和检测(详见每十九章 ) ◦ (一)核酸探针的常用酶促标记技术 ◦ (二)核酸探针的非放射性标记技术 ◦ (三)非放射性探针的显示体系 五、核酸分子杂交的类型 ◦ (一)固相膜...
...mol/L EDTA3.探针沉淀液(三)cRNA探针非同位素标记(地高辛及生物素)1.标记液△:生物素标记时为10mmol/L的生物素-11-UTP※:为检测标记率而加。2.转录标记终止液(1)0.2mol/L EDTA:用于地高辛标记法(2)...
...反向杂交:这个杂交类型是用标记的样品核酸与未标记的固化探针DNA杂交,故称为“反向杂交”。这种杂交方法的优点是在一次杂交中,可同时检测样品中几种核酸。这种杂交方式主要用于进行中的核转录试验和多种病原微生物的检测,前者是在转录过程中标记RNA...
所有搜索结果仅供参考,如需解决具体问题请咨询相关领域专业人士。