...必须购买或自制抗凝集素抗体。3.糖—凝集素—糖法 本法是利用过量的凝集素与组织切片中特定的糖基相结合。经冲洗后,凝集素上还存在未被占用的结合部位,将这些部位与有过氧化物酶标记的特异性糖基相结合,形成一个三明治样的糖—凝集素—糖的结合物。(1)...
...下金颗粒可见性的免疫金银染色法(Immunogold—sliver staining, IGSS)。到了1986年Fritz等人在免疫金银法基础上成功地进行了彩色免疫金银染色,使得结果更加鲜艳夺目。胶体金技术逐渐得到完善和成熟,近10年来...
...引物法或末端加尾法等把修饰的核苷酸如生物素-11-dUTP掺入到探针DNA中,制成标记探针,敏感度高于化学修饰法,但操作程序复杂,产量低,成本高。化学修饰法是将不同标记物用化学方法连接到DNA分子上,方法简单,成本低,适用于大量制备(>50μ...
...℃热板上30s,应用2×SSC漂洗,然后用生物素标记核酸探针进行杂交。载片在95℃热板上5min,然后移入温盒,48℃孵育4h或过夜。次日PBS漂洗,以抗生物素标记FITC抗血清(100μg/ml PBS pH7.2)37℃孵育1h,PBS...
...注:BSA液用前应用Whatman 3mm滤纸过滤。14.兔抗生物素(α-生物素)单克隆抗体用PBT液1:100稀释。该单抗现可从英国Dako公司购得。15.金(10~20nm)标羊抗兔二抗用PBT液1:50稀释。16.银溶液(...
...probes)已被成功的用于原位杂交实验。图20-2 示cDNA转录为cRNA,可标记以不同的标记物,然后与细胞中的mRNA相结合。Biotin(生物素),Au(金),digo-(地高辛)一、同位素标记cRNA探针在ISHH中的应用(一)组织...
...为50μl:40mmol/l Tris HCl pH8.0、8mmol/l MgCl2、2mmol/L亚精胺、25mmol/l NaCl, 1mmol/L每一ATP、GTP、GTP,1mmol/L生物素Bio-11-Dutp,500ng模板...
...有相应试剂出售。目前非放射性标记物有下述几类:金属如Hg、荧光物质如F2TC、半抗原如地高辛、生物素、酶类如辣根过氧化物酶(HRP)、半乳糖苷酶或碱性磷酸酶(AKP)等,不同的标记物,所标记探针的方法及检测方法也各异。核酸探针的常用酶促...
...B族维生素中尚有泛酸及生物素,它们具有很重要的生理功能,但由于来源广泛,人体未发现有典型的缺乏病例。5.13.1 泛酸泛酸是丙氨酸藉肽键与α,γ-二羧-β-β-二甲基丁酸缩合而成,它是辅酶A(CoA)及酰基载体蛋白(acyl ...
...推出多种非放射性探针标记试剂盒,在国内也已具备生物素类标记物的生产能力,并有相应试剂出售。目前,非放射性标记物有下述几类:金属如Hg,荧光物质如FITC;半抗原如地高辛;生物素;酶类如辣根过氧化物酶(HRP)。半乳糖苷酶或碱性磷酸酶(AKP...
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