...指示酶反应较慢且不稳定,称为延滞期。显然这期间指示酶反应速度不能代表测定酶量多少。设计或选择酶测定方法时,如果用酶偶联法,延滞期越短越好,测定时间一定要避开此期。是不是所有类型的酶偶联反应都可用来测酶活性浓度?回答是否定的。因为测酶的活性浓度...
...16-1)。若将抗原抗体复合物与游离标记抗原分开,分别测定其放射性强度,就可算性结合态的标记抗原(B)与游离态的标记抗原(F)的比值(B/F),或算出其结合率[B/(B+F)],这与标本中的抗量呈函数关系。用一系列不同剂量的标准抗原进行反应...
...放射免疫分析是由Yalow和Berson于1960年创建的标记免疫分析技术。由于标记物放射性核素的检测灵敏性,本法的灵敏度高达ng甚至pg水平。测定的准确性良好,ng量的回收率接近100%。本法特别适用于微量蛋白质、激素和多肽的定量测定。...
...从理论上讲,用细胞化学方法能显示的酶,均可用于标记抗体,进行ICC染色,但实际上在ICC中所能用的酶并不多。现将常用的几种酶列于表4-1,供选用时参考。表4-1 免疫细胞化学常用的酶名 称分 子 量内 源 性商 品Horseeradish...
...血清分别收集20份以上正常人血于干燥灭菌的玻璃瓶中,待血凝固后,放于37℃保温5~6小时,置4℃冰箱过液,分离血清,混匀,定量分装(0.5ml/安瓿),冷冻干燥,-20℃保存。用时,取冻干品1支,按标示量加蒸馏水溶解,然后用咪唑缓冲液作1∶...
...131I标记的血浆蛋白,待与体内血浆混匀后,再抽血测定T1824或131I被稀释的倍数,即可计算出血浆量。同样,可由静脉注射一定量用51Cr或32P标记的红细胞,待与体内的红细胞混匀后,抽血以测定标记的红细胞稀释的倍数,即可计算出红细胞总量...
...131I标记的血浆蛋白,待与体内血浆混匀后,再抽血测定T1824或131I被稀释的倍数,即可计算出血浆量。同样,可由静脉注射一定量用51Cr或32P标记的红细胞,待与体内的红细胞混匀后,抽血以测定标记的红细胞稀释的倍数,即可计算出红细胞总量...
...胶体金与蛋白质的结合成功与否,取决于pH值,一般只有在蛋白质等电点(PI)略偏碱的条件下二者才能牢固地结合,因此,标记之前须将胶体金溶液的pH值调至待标记蛋白质的等电点略偏碱。需要提高胶体金的pH值时可用0.1molK2CO3,需要降低...
...血清分别收集20份以上正常人血于干燥灭菌的玻璃瓶中,待血凝固后,放于37℃保温5~6小时,置4℃冰箱过液,分离血清,混匀,定量分装(0.5ml/安瓿),冷冻干燥,-20℃保存。用时,取冻干品1支,按标示量加蒸馏水溶解,然后用咪唑缓冲液作1∶...
...探针。这种标记方法称为缺口平移法。用标记在DNA上的生物素与链霉亲合素-酶(过氧化物酶或碱性磷酸酶)标记物进行检测。缺口平移法标记生物素DNA探针:在硅化Eppendorf管(放入冰浴中)加下列反应液:待标记DNA 0.1μg/μl 5μl...
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