本法应用直接法或间接法的原理和步骤，可对活细胞在试管内进行染色，常用于T和B细胞、细胞培养物、瘤细胞抗原和受体等的检查和研究，阳性荧光主要在细胞膜上。FACS即采用此法原理。
角膜 、 结膜 上皮 损伤或有 溃疡 时，可被 荧光素 染色 ，方法是点 无菌 的1%荧光素液于 结膜囊 内，然后用 生理盐水 冲洗，亦可用玻璃棒蘸少量药液于结膜囊内，进行观察。此时可见角膜、结膜破损处有嫩绿色着色，上皮完整处不染色。如有 角膜瘘 ，点荧光素后作轻压 眼球 ，可见角膜表面布满黄绿色荧光素，而在瘘管处则有液体流出，状如清泉外流。操作时注意勿污染...
（一）荧光色素 许多物质都可产生荧光现象，但并非都可用作荧光色素。只有那些能产生明显的荧光并能作为染料使用的有机化合物才能称为免疫荧光色素或荧光染料。常用的荧光色素有： 1．异硫氰酸荧光素（fluoresceinisothiocyanate，FITC）为黄色或橙黄色结晶粉末，易溶于水或酒精等溶剂。分子量为389.4，最大吸收光波长为490495nm，最大发射...
角膜、结膜上皮损伤或有 溃疡 时，可被荧光素染色，方法是点无菌的1%荧光素液于结膜囊内，然后用生理盐水冲洗，亦可用 玻璃 棒蘸少量药液于结膜囊内，进行观察。此时可见角膜、结膜破损处有嫩绿色着色，上皮完整处不染色。如有 角膜瘘 ，点荧光素后作轻压眼球，可见角膜表面布满黄绿色荧光素，而在瘘管处则有液体流出，状如清泉外流。操作时注意勿污染被检者面部及衣服。由于荧光...
（一）抗体的荧光素标记 用于标记的抗体，要求是高特异性和高亲和力的。所用抗血清中不应含有针对标本中正常组织的抗体。一般需经纯化提取IgG后再作标记。作为标记的荧光素应符合以下要求：①应具有能与蛋白质分子形成共价健的化学基团，与蛋白质结合后不易解离，而未结合的色素及其降解产物易于清除。②荧光效率高，与蛋白质结合后，仍能保持较高的荧光效率。③荧光色泽与背景组织的...
荧光免疫技术是标记免疫技术中发展最早的一种。很早以来就有一些学者试图将抗体分子与一些示踪物质结合，利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。Coons等于1941年首次采用荧光素进行标记而获得成功。这种以荧光物质标记抗体而进行抗原定位的技术称为荧光抗体技术（fluorescentantibodytechnique）。 由于一般荧光测定中的本底较高等问题...
荧光抗体是免疫荧光细胞化学的重要技术之一，制备高特异性和高效价的荧光抗体必须选用高质量的荧光素和高特异性高效价的免疫血清。
一、时间分辨荧光免疫测定
荧光免疫技术是标记免疫技术中发展最早的一种。很早以来就有一些学者试图将抗体分子与一些示踪物质结合，利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。Coons等于1941年首次采用荧光素进行标记而获得成功。这种以荧光物质标记抗体而进行抗原定位的技术称为荧光抗体技术（fluorescentantibodytechnique）。 由于一般荧光测定中的本底较高等问题...
荧光抗体是免疫荧光细胞化学的重要技术之一，制备高特异性和高效价的荧光抗体必须选用高质量的荧光素和高特异性高效价的免疫血清。
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