...绿色荧光)及异硫氰四乙基罗达明(Rodamine B-200,显橙红色荧光),对各种抗体进行标记。必须指出,每种荧光抗体只能检测一种相应抗原,因此必须准备多张冰冻切片,才能满足检查要求。一般在检查每一种抗原时,只能使一种相应抗体用荧光显微镜...
...。另外,铁蛋白标记抗体的特点之一是分子量大。因此,如用于细胞表面抗原的定位研究,可将样品直接放入固定液,否则需采取适当的措施,打破细胞膜,增强细胞对标记抗体的通透性,常采取以下方法:(1)冻融法:将小块组织或细胞经固定后,冻融一次,使细胞膜...
...8.0,0.01%Nanidet P-40)40℃,进行检测系统的显示如荧光-亲合素标记,过氧化物酶-亲合素标记等。总之,自Gall 和Pardue 1969年建立杂交免疫细胞化学以来的20余年中,已有不少新的改良的方法出现,但基本原则仍为Gall和...
...免疫化学方法是利用抗原与其相应抗体具有特异结合的特性,用荧光素、酶、发光素、同位素、胶体金标记某种抗原的抗体,借助荧光显微镜、电镜、图像分析仪、同位素监测仪、分光亮度仪便可对组织中的抗原进行定性或定量,可用于胶原、蛋白多糖、弹性蛋白、粘连...
...免疫化学方法是利用抗原与其相应抗体具有特异结合的特性,用荧光素、酶、发光素、同位素、胶体金标记某种抗原的抗体,借助荧光显微镜、电镜、图像分析仪、同位素监测仪、分光亮度仪便可对组织中的抗原进行定性或定量,可用于胶原、蛋白多糖、弹性蛋白、粘连...
...鉴于这些方法繁琐、费时、须胃镜取材才能完成等,寻找一种敏感性高、特异性好、快速且简便的诊断Hp的方法,是目前急需研究和解决的问题。本文报道建立一种新的免疫酶技术—“双特异抗体”酶免疫染色法,现将结果报告如下。1 材料和方法1.1 材料①试剂:...
...也可引起回忆性抗体反应。 检测AIAb的方法有ELISA法、免疫斑点法等,现介绍ELISA法:操作步骤 用纯化人、猪或牛结晶胰岛素进行包被,待测血清作l:10稀释,再加最适量工作浓度的HRP标记抗人IgC抗体或标记的抗人IgA的F(ab’)...
...数次。(3)置于HRP标记抗体液(第二抗体)4℃过夜。然后用4℃含蔗糖PBS反复冲洗数次。4℃浸漂过夜。(4)2.5%戊二醛(pH7.4磷酸缓冲液)再固定1h,4℃用含蔗糖PBS反复冲洗去戊醛,每次5min,共洗3次。(5)DAB-H2O2...
...性抗体反应。 检测AIAb的方法有ELISA法、免疫斑点法等,现介绍ELISA法:操作步骤 用纯化人、猪或牛结晶胰岛素进行包被,待测血清作l:10稀释,再加最适量工作浓度的HRP标记抗人IgC抗体或标记的抗人IgA的F(ab’):,加底物...
...μg/ml过氧化物酶标记的抗生物素液孵育90min,水洗。(4)酶呈色反应。BRAB法和LAB示是Guesdon及其同事们(1979)建立的,由于这二种方法都需以生物素标记第一抗体,应用不如ABC法普遍。但用于免疫细胞中免疫球蛋白的显示具有...
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