此法标记原理如下图所示： 标记的HRP部分催化底物化学发光反应：氨基苯二甲酰肼 氨基苯二甲酸 +N 2 +光→X-光片上感光10～20min显定影。 光亮子在酚、萘及胺类等增强剂促进下，而使光亮增强。 这种方法就是利用特殊的酶底物，氧化后把产生的能量转变为光能放出，称为化学发光。杂交后与探针结合的酶催化相应的发光剂，经增强剂将光能放大，在X光片上显示杂交信号...
（一）基本原理 应用DNA探针缺口翻译（nick translation）方法，通过碱基配对以一条DNA链为模板，将生物素标记的某一种脱氧三磷酸核苷酸如Bio-dUTP渗入有缺口的DNA链。将生物素标记的DNA探针与细胞或组织进行原位杂交。显示方法有二种：一种是用HRP显示，类似免疫电镜技术中采取的包埋前染色法，利用地高辛-过氧化物酶HRP显色法进行光镜水平...
基因探针根据标记方法不同可粗分为放射性探针和非放射性探针两大类，根据探针的核酸性质不同又可分为DNA探针，RNA探针，cDNA探针，cRNA探针及寡核苷酸探针等几类，DNA探针还有单链和双链之分。下面分别介绍这几种探针。
基因探针 基因探针，即 核酸 探针 ，是一段带有检测标记，且顺序已知的，与目的 基因 互补的核酸序列(DNA或RNA)。基因探针通过 分子杂交 与目的基因结合，产生杂交信号，能从浩翰的 基因组 中把目的基因显示出来。根据杂交原理，作为探针的核酸序列至少必须具备以下两个条件：①应是 单链 ，若为双链，必须先行变性处理。②应带有容易被检测的标记。它可以包括整个基...
利用寡核苷酸自动合成仪，可很简单地合成制备寡核苷酸探针（如15～50bp），这类探针具有以下优点：①短的探针比长探针杂交速度快，特异性强。②可以在短时间内大量制备。③在合成中进行标记制成探针。④可合成单链探针，避免了用双链DNA探针在杂交中自我复性，提高杂交效率。⑤寡核苷酸探针可以检测小DNA片段，在严格的杂交条件下，可用于检测在序列中单碱基对的错配。 因此...
...可随所处环境的性质，如极性、 折射率 、黏度等改变而灵敏地改变的一类荧光性 分子 ，包括有机 试剂 或金属螯合物。 最常用于荧光 免疫 法中标记 抗原 或 抗体 ，亦可用于 微环境 ，如表面活性剂 胶束 、双分子膜、 蛋白质 活性点位等处微观特性的探测。通常要求 探针 的摩尔 吸光系数 大，荧光量子产率高；荧光发射波长处于长波且有较大的斯托克斯位移；用于免疫...
利用寡核苷酸自动合成仪，可很简单地合成制备寡核苷酸探针（如15～50bp），这类探针具有以下优点：①短的探针比长探针杂交速度快，特异性强。②可以在短时间内大量制备。③在合成中进行标记制成探针。④可合成单链探针，避免了用双链DNA探针在杂交中自我复性，提高杂交效率。⑤寡核苷酸探针可以检测小DNA片段，在严格的杂交条件下，可用于检测在序列中单碱基对的错配。 因此...
（1）将整封染色体铺片放置于金网上，在70%的酒精蒸汽固定4～15h，空气干燥。 （2）以强碱使DNA变性，将金网置于2×SSC内（应用0.1n NaOH调整至pH12），室温，2min。 （3） 脱水 ，以70%和95%酒精各冲洗3次，空气干燥。 （4）杂交，金网覆于平面 玻璃 皿（ Petri dish）内的杂交液滴上，每滴约10～15μl，将此小碟置于...
利用寡核苷酸自动合成仪，可很简单地合成制备寡核苷酸探针（如15～50bp），这类探针具有以下优点：①短的探针比长探针杂交速度快，特异性强。②可以在短时间内大量制备。③在合成中进行标记制成探针。④可合成单链探针，避免了用双链DNA探针在杂交中自我复性，提高杂交效率。⑤寡核苷酸探针可以检测小DNA片段，在严格的杂交条件下，可用于检测在序列中单碱基对的错配。 因此...
标记基因 原本是 基因工程 的专属名词，但是现在它已经成为一种基本的实验工具，广泛应用于 分子 生物学 、 细胞生物学 、发育生物学等方面的研究。 标记基因是一种已知功能或已知序列的 基因 ，能够起着特异性标记的作用。在基因工程意义上来说，它是 重组 DNA载体的重要标记，通常用来检验转化成功与否；在 基因定位 意义上来说，它是对目的基因进行标志的工具，通常...
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