...(1)用有Formvar 膜的镍网沾取金标蛋白溶液,空气中干燥后醋酸铀复染,在TEM下观察,可见金颗粒周围有一明显的空晕,表示颗粒表面吸附有蛋白质分子。(2)纯化后免疫金探针是否保持很好的生物学活性是判断其质量好坏的主要指标,因此,在使用...
...;若受体动物为家兔时,使用的Ab1量可达100-200μg。(二)免疫动物的选择抗独特型抗体可在自身体内、同类系、同种异体以及异种动物中诱导产生,因此在制备抗独特型抗体时可根据不同情况选用同类系、同种异体或异种动物(表9-1)。从制备技术上...
...液)106杂交瘤细胞株,置聚乙烯塑料盒。-40~-80℃过夜,尔后移至液氮罐保存。图 18-1 单克隆抗体的制备(源自:Goding JW.1987)(3)抗体的检测抗体检测可分别采用免疫火箭电泳法、单向扩散法、免疫电泳法、ELISA法、...
...制备单克隆抗体是复杂而费时的工作,整个技术流程如图11-2。(一)抗原提纯与动物免疫对抗原的要求是纯度越高越好,尤其是初次免疫所用的抗原。如为细胞抗原,可取1×107个细胞作腹腔免疫。可溶性抗原需加完全福氏佐剂并经充分乳化,如为聚丙烯酰胺...
...关注。二、免疫金银法1983年,Holgate等人将IGS与银显影方法相结合创立了免疫金银法(Immunogold—sliver staining, IGSS)IGSS的基本原理是通过免疫反应沉积在抗原位置的胶体金颗粒起着一种催化剂作用,用...
...当蛋白质的最适稳定量及标记的最佳pH值被确定以后便可进行标记。具体步骤如下:(1)根据用以标记的胶体金的总量计算出所需要的待标记蛋白质的总量。(2)在电磁搅拌下,将蛋白质溶液加入胶体金溶液中(pH已调至PI超过0.5pH),加入蛋白质时...
...文献报告应用较多的是植物凝集素—胶体金免疫标记技术,常用的如刀豆球蛋白(Con A)-- 胶体金免疫标记技术,如第六章 所述,Con A 能与细胞膜中的甘露糖结合,能标记内质网膜、核被膜以及细胞膜的EF面,有助于糖蛋白在超微结构水平的定位。为...
...胶体金与蛋白质的结合成功与否,取决于pH值,一般只有在蛋白质等电点(PI)略偏碱的条件下二者才能牢固地结合,因此,标记之前须将胶体金溶液的pH值调至待标记蛋白质的等电点略偏碱。需要提高胶体金的pH值时可用0.1molK2CO3,需要降低...
...制备单克隆抗体是复杂而费时的工作,整个技术流程如图11-2。(一)抗原提纯与动物免疫对抗原的要求是纯度越高越好,尤其是初次免疫所用的抗原。如为细胞抗原,可取1×107个细胞作腹腔免疫。可溶性抗原需加完全福氏佐剂并经充分乳化,如为聚丙烯酰胺...
...三节 化学发光免疫测定 一、化学发光酶免疫测定 二、化学发光标记免疫测定 三、电化学发光免疫测定 四、在医学检验中的应用 第十九章 金免疫技术 第一节 免疫胶体金的制备 一、胶体金的特性和制备 二、免疫金的特性和制备 第二节 金免疫测定 一、...
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