...-anslation)。根据这个原理,如果用高强度的放射性核苷酸(通常为α-32PdATP)置换先前存在的核苷酸,则可制备比活性高达108cpm(每分钟计数)/μg的32P标记DNA。用缺口平移法标记的DNA探针能满足大多数杂交要求。2....
...-N-羟基琥珀标记化学修饰的DNA法 五、缺口平移法标记生物素DNA探针(二步法) 六、生物素随机引物标记探针方法 七、异羟基洋地黄毒甙(Digoxigenin)标记核酸探针 八、光敏2,4-二硝基苯(光敏DNP)标记DNA法 九、三硝基苯...
...随机引物标记探针方法 七、异羟基洋地黄毒甙(Digoxigenin)标记核酸探针 八、光敏2,4-二硝基苯(光敏DNP)标记DNA法 九、三硝基苯磺酸(TNBS)标记核酸探针 十、生物素化的RNA探针标记 十一、辣根过氧化物酶标记核酸探针法 ...
...rpm离心15min,弃上清。(8)用75%的酒精洗涤2次,每次均于4℃,10000rpm离心5min,弃上清。(9)真空抽干,并用适量1×TE溶解沉淀。如此即得所需DNA片段。三、地高辛配基随机标记DNA探针法(一)概述基因诊断是以核酸分子...
... 漂洗5min×3。4.荧光标记DNA探针在细胞核混悬液杂交中的应用(1)细胞核的分离:将培养的细胞制成细胞混悬液,或以胰蛋白酶消化法于培养盖上收集培养细胞。应用MgSO4染色分离方法分离细胞核(Van den Engh etal 1986...
...4.荧光标记DNA探针在细胞核混悬液杂交中的应用(1)细胞核的分离:将培养的细胞制成细胞混悬液,或以胰蛋白酶消化法于培养盖上收集培养细胞。应用MgSO4染色分离方法分离细胞核(Van den Engh etal 1986, 在Traok和...
...ester, DNP)。通过酰胺化反应把半抗原结合到抗体分子上。在间接法(二步法)中,先以半抗原标记的特异性抗体(第一抗体)孵育切片,然后加入半抗原的标记抗体,(标记物可为荧光素或酶)(图6-4)。在PAP染色(三步法)中,先用半抗原标记的第一...
...ester, DNP)。通过酰胺化反应把半抗原结合到抗体分子上。在间接法(二步法)中,先以半抗原标记的特异性抗体(第一抗体)孵育切片,然后加入半抗原的标记抗体,(标记物可为荧光素或酶)(图6-4)。在PAP染色(三步法)中,先用半抗原标记的第一...
...(基因型)的野生与栽培药材的鉴别也存在一定困难,单一的DNA分子标记鉴别无法解决中药材鉴别的所有难题。因此,积极寻找与各种新型方法技术的有机联用,将可能为中药材鉴别提供崭新的空间。如飞速发展的代谢组学研究为中药材代谢标识物鉴别提供了可能,...
...mol/l NaCl, 0.2mol/L NaH2PO4(PH7.4), 20mmol/L EDTA(pH7.4)。⑦将滤膜用滤纸吸干,80℃真空烘干2h。以下操作参考前述。2.斑点杂交(Dot blot)斑点杂交法是将被检标本点到膜上,烘烤...
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