...在一个典型的PCR反应体系中需加入:适宜的缓冲液、微量的模板DNA、4×dNTPs、耐热性多聚酶、Mg2+和两个合成的DNA引物。模板DNa 94℃变性1min,引物与模板40~60℃退火1min,72℃延伸2min。在首次循环前模板预...
...通过上述内容。可以看出有许多因素可以影响PCR的特异性,在此我们作一归纳,供大家参考:①退火步骤的严格性:提高退火温度可以减少不匹配的杂交,从而提高特异性。②减短退火时间及延伸时间可以减少错误引发及错误延伸。③引物二聚体是最常见的副产品,...
...加入Taq DNA聚合酶0.5~2u,在旋涡混合器上混匀简单离心一下,加入35μl石蜡油。放入65℃水浴2min,取出,立即进入PCR循环:91℃变性30s,51。C退火1min,68℃延伸2min。重复上述过程15次。最后将反应管置65℃...
...锚定PCR(AnchoredPCR, A-PCR)主要用于分析具有可变末端的DNA序列,Loh等用A-PCR对人外周血淋巴细胞T细胞受体α-链的mRNA的多变性进行了分析。先合成cDNA,并用末端脱氧核苷酸转移酶在其3’-可变区末端加上...
...;改变两引物浓度,使其相差100倍,结果得到大量单链产物,称为不对称PCR,其单链产物可用于序列分析;在一个反应中加入多对引物同时检测多个部位的多重PCR等等。三、扩增片段长度多态性小卫星DNA和微卫星DNA的长度多态性可以通过PCR扩增后...
...英国的研究者称,干细胞移植后进行定量的反转录多聚酶链反应(RT-PCR)有助于慢性髓细胞性的进一步治疗。 伦敦Hammersmith 医院的Eduardo Olaverria 及其同事解释说:“RT-PCR已经广泛地应用于异基因干细胞移植...
...符合,相当 [fit;match;suit] 令作诗,不能称前时之闻。——宋· 王安石《伤仲永》 薄罚不为慈,诛严不为戾,称俗而行也。——《韩非子·王蠹》 夫才德不称,固自知之矣。——宗臣《报刘一丈书》 又如:对称;相称;称合(相当);称...
...胸廓单侧膨隆,常见于一侧大量胸腔积液、气胸或胸腔肿瘤;两侧对比,病侧隆起,则健侧似较平坦,胸壁局限性突起常见于心脏扩大、心包积液、主动脉瘤、胸内或胸壁肿瘤等;胸廓单侧局限性凹陷,可见于肺不张、肺萎缩、肺纤维化、广泛肺结核及胸膜粘连等。...
...体格检查即可诊断。...
...称了薪柴才去生火煮饭。比喻斤斤于细节而不识大体。同“称薪而爨”。 明·冯梦龙《警世通言》卷五:“积财聚谷,日不暇给。真个是数米而炊,称柴而爨。”...
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