...ml)。戊二醛是二醛基化合物,交联结合力比甲醛大,Bullock认为交联过强,可出现组织改变和空间遮蔽现象,影响组织的抗原性。但McDonald等认为,该试剂用于PAP法免疫酶标记效果仍满意。(5)甲醛升汞固定液(即B5固定液。浓甲醛10...
...translation),利用此反应可在体外对DNA片段进行放射性磷(α-32PdNTP)的标记制成探针(probe),进行核酸的分子杂交实验,是现代分子生物学的一项重要技术(图16-11)。 图16-11 缺刻平移标记DNA探针许多实验证实DNA ...
...效应,一旦经酶作用便形成具有强荧光的物质。例如4-甲基伞酮-β-D半乳糖苷受β-半乳糖苷酶的作用分解成4-甲基伞酮,后者可发出荧光,激发光波长为360nm,发射光波长为450nm。其他如碱性酸酶的底物4-甲基伞酮磷酸盐和辣根过氧化物酶的底物...
...抗体产生细胞胞浆内含有相对多的抗原,故采用直接或间接法免疫细胞化学技术可简化步骤,节 省时间,降低成本。为了清除组织间弥散的免疫球蛋白,我们在固定前用PBS浸洗,取得良好的效果。用双标记免疫荧光技术可以在同一张切片上显示出两种不同的抗体...
...DNA从细胞中洗提出来,然后在细胞和玻片的水相中进行PCR。用地高辛标记的人全基因组DNA探针杂交表明在起始循环中DNA极微量,而30个循环后很丰富。常规细胞染色表明只有少量的形态改变。Silde-PCR对于玻片上的细胞样品提供了一种较好的...
...建立的均相酶免疫测定称为克隆酶供体免疫测定(clonedenzymedonorimmunoassay,CEDIA)。CEDIA的反应模式为竞争法,测定原理为:标本中的抗原和ED标记的抗原与特异性抗体竞争结合,形成两种抗原抗体复合物。ED标记...
...骨髓或血细胞中,有的含过氧化物酶。该酶可分解H2O2,产生新生态氧。新生态氧可将无色的联苯胺氧化为联苯胺蓝,进而变成棕黑色化合物,沉淀于胞质内。 对白血病诊断有意义,急性粒细胞白血病除早期原粒细胞呈阴性反应或弱阳性反应外,其余各阶段均...
...磷酸二酯键连接而成的线性多核苷酸片段。目前多由仪器自动合成而用作DNA合成的引物(Primer)、基因探针(probe)等,在现代分子生物学研究中具有广泛的用途。表示一个核酸分子结构的方法由繁至简有许多种(图15-2)。由于核酸分子结构除了两端和...
...结合。反应平衡后,剩余的ED标记抗原与EA结合,形成具有活性的酶(图15-3)。加入底物测定酶活力,酶活力的大小与标本中抗原含量成正比。CEDIA主要用于药物和小分子物质的测定。图15-3CEDIA原理示意图...
...灵敏度,还可使用同位素标记的底物进行酶测定,例如,有人以C12标记的乙酰胆碱为底物测定胆碱酯酶,在酶作用后以离子交换法分离出含C14的乙酸。同位素方法由于对人体有害,操作麻烦,目前已很少使用。...
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