...TA中。置4℃备用。 2.由冰冻组织标本制备模板DNA：①用恒冷切片机切取一块5～10μm冰冻组织块，置于1.5ml塑料管中。②加入10%用缓冲液配制的福马林。③ 10min后离心1～2min轻轻倾去上清液，沉淀用乙醇洗2次。④于室温干燥10～60min。⑤ 加入抽提缓冲液（100mmol/L Tris-HCl，4mmol/l EDTA、pH8.0,400μ...
...l酚和氯仿：异戊醇（24：1）各提两次，上清加无水乙醇1.0ml放置于-20℃2h，以12kr/min离心5min，真空干燥后加50μlTE缓冲液溶解，4℃保存备用。 2．多聚酶链反应 Primer1：5'-GTGACC GAT GGC TTC AGT TCC CTG-3'，primer2:5'-GGt AGG AGAGCA CTC AGA ATA CA-3...
... （1）所染的全部切片均为阴性结果：包括阳性对照在内，全部呈阴性反应，原因可能是：①染色未严格按操作步骤进行；②漏加一种抗体，或抗体失效；③缓冲液内含叠氮化钠，抑制了酶的活性；④底物中所加H2O2量少或失效；⑤复染或 脱水 剂使用不当。 （2）所有切片均呈弱阳性反应：①切片在染色过程中抗体过浓，或干燥了；②缓冲液配制中未加氯化钠和pH值不准确，洗涤不彻底；③...
...l酚和氯仿：异戊醇（24：1）各提两次，上清加无水乙醇1.0ml放置于-20℃2h，以12kr/min离心5min，真空干燥后加50μlTE缓冲液溶解，4℃保存备用。 2．多聚酶链反应 Primer1：5'-GTGACC GAT GGC TTC AGT TCC CTG-3'，primer2:5'-GGt AGG AGAGCA CTC AGA ATA CA-3...
...l酚和氯仿：异戊醇（24：1）各提两次，上清加无水乙醇1.0ml放置于-20℃2h，以12kr/min离心5min，真空干燥后加50μlTE缓冲液溶解，4℃保存备用。 2．多聚酶链反应 Primer1：5'-GTGACC GAT GGC TTC AGT TCC CTG-3'，primer2:5'-GGt AGG AGAGCA CTC AGA ATA CA-3...
...主张配方中加入30ml 甘油 ,防止甲酸挥发,并可使细胞染色清晰.甲醇必须纯净,如甲醇中 丙酮 含量过多,染色偏酸,使细胞着色不良。 磷酸盐缓冲液 (PH6.4-6.8)： 磷酸二氢钾 0.3g加 磷酸氢二钠 0.2g再加蒸馏水至1000ml,配制成磷酸盐缓冲液调整PH,如无 缓冲液 可用新鲜蒸馏水代替。 血涂片-白细胞分类计数正常参考值 细胞类别成人 杆状...
...e,pH4～6,LKB产品）；⑷丙烯酰胺（Acr）、N-N'甲叉双丙烯酰胺（Bis），Serva产品；⑸TEMED（Sigma产品）；⑹电泳缓冲液：1mol/lNaOH,1mol/L H 3 PO 4 ；⑺转移电泳缓冲液：含20%甲醇，39mmol/L甘氨酸，48mmol/lTris和0.0375%SDS；⑻洗涤液（TPBS）含0.05%吐温-20，0.9%...
...DNA： （1）标本的处理： ①取材部位为子宫颈管，男性为尿道，将灭菌白金耳深入宫颈管或尿道1cm左右，转动数圈，停留约30s，取出后置标本缓冲液中。 ② 衣原体DNA提取： 将宫颈管内或尿道内刮取物置含0.5% NP-40、0.5%Tween 20，1% SDS和2mg/ml 蛋白酶K的TES缓冲液（50mmol/L Tris-HCl，50mmol/l N...
...放在盛有液氮的培养皿中，培养皿放置于二氧化碳—液氮槽中，用预冷的解剖刀切割凝胶小块进行冷冻断裂。 ③解冻，置碎块于30%甘油—1%戊二醛磷酸缓冲液中解冻。 ④置换甘油，放入1mmol/l 氨基乙酰甘氨酸磷酸液去甘油，PBS冲洗，3min×2。 ⑤免疫标记。 ⑥1%锇酸，室温固定30min。 ⑦系列梯度乙醇 脱水 ，临界点干燥，喷镀铂—碳膜，次氯酸钠清洗复型，...
...化后滤过，调节pH值使灭菌后为6.5～6.6，在115℃灭菌30分钟。 培养基Ⅷ 酵母浸出粉 1g 琼脂 15～20g 硫酸铵 1g 磷酸盐缓冲液(pH6.0) 1000ml 葡萄糖 5g 混合上述成分，加热溶化后滤过，在115℃灭菌30分钟。 营养琼脂培养基 胨 10g 琼脂 15～20g 氯化钠 5g 肉浸液 1000ml 除琼脂外，混合上述成分，调节p...
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