1.组织切片中T淋巴细胞80年代以前多用 玫瑰花 瓣试验和酸性酯酶方法进行组织切片中T淋巴细胞研究,特异性较差。近年来多用O KT ,Leu或CD等系列T淋巴细胞单克隆抗体进行研究,特异性高,可以分类出各种亚群。免疫组化染色中应注意以下几个方面: (1)抗体的选择:根据不同目的选择相应的抗体,如要对人胃肠道组织进行研究,可选用OKT系统单抗;对鼠类等进行研究
新月体性肾小球肾炎时,在新月体内可见有IgG及补体C3呈颗粒状沉积,并常出现纤维蛋白元(Fb)沉积。在Goodpasture 综合征时常可有多数新月体形成,亦可在新月体内出现IgG及纤维蛋白元的颗粒状沉积。
(1)切片固定后用毛细滴管吸取经适当稀释的免疫血清滴加在其上,置于染色盒中保持一定的湿度,37℃作用30min。然后用0.01mol/l pH7.2PBS洗两次,10min,用吸水吸去或吹干余留的液体。 (2)再滴加间接荧光抗体(如兔抗人γ-球蛋白荧光抗体等),同上步骤,染色30min,37℃,缓冲盐水洗两次10min,搅拌,缓冲甘油封固,镜检。 对照染色:
神经细丝(neurofilaments, NF)分布于神经原细胞体和轴突、树突,副交感神经节 ,肾上腺内外嗜铬组织等,因此,节 神经瘤、肾上腺内或外 神经母细胞瘤 、小脑神经母细胞瘤、副节 神经瘤均呈NF阳性反应,并且,分化较好的肿瘤的NF阳性瘤细胞数量要比分化差的多,在儿童的未分化神经母细胞瘤常呈弱阳性反应。NF免疫细胞化学染色有助于神经系统肿瘤的鉴别诊断
RNA探针是一类很有前途的核酸探针,由于RNA是单链分子,所以它与靶序列的杂交反应效率极高。早期采用的RNA探针是细胞mRNA探针和病毒RNA探针,这些RNA是在细胞基因转录或病毒复制过程中得到标记的,标记效率往往不高,且受到多种因素的制约。这类RNA探针主要用于研究目的,而不是用于检测。例如,在筛选逆转录病毒 人类 免疫缺陷 病毒(HIV)的基因组DNA克
由于DNA分子中核苷酸序列分析以及一级结构与功能相关的研究,使得人们有可能进一步了解DNA一级结构与基因组织的关系。已经证实,自然界极大多数生物体遗传信息贮存在DNA的核苷酸排列顺序中,因此,基因是DNA的一个片段,只有少数病毒的遗传信息贮存在RNA分子中。DNA分子中不同区域有不同功能,有些区域可编码蛋白质(最终产物是蛋白质),有些区域可编码RNA(最终产
用人肾(新鲜手术或尸检6h以内)采用肾皮质或大白 鼠肾 脏冰冻切片不需任何固定,作检查AMA抗体的抗原底物,间接免疫荧光结果可见远端肾小管上皮细胞浆呈现均匀的荧光。Walker等(1965)首先用此法在原发性 胆汁 性 肝硬化 ,隐原性肝 硬化 和慢性活动性 肝炎 中发现AMA,以 原发性胆汁性肝硬化 (158例/188例)阳性率最高(84%),由于阻塞性肝
可制作涂片、印片、细胞单层培养物、组织切片,经适当固定或不固定,作免疫荧光染色用。
狼疮性肾炎 时,肾间质可见有多种免疫球蛋 白及 补体C3沉积。Sjogren综合征的部位病例可于肾间质内有IgG呈颗粒状沉积。在以单核细胞浸润为主要表现的 间质性肾炎 ,肾间质中可用Tamm – Horstall糖蛋白的沉积。
色素痣 可表达与黑素细胞相同的抗原,且通常较强。1987年Nakanish等曾克隆出一析仅与色素痣而不与正常黑素细胞及黑素瘤细胞反应的单抗TNKH 1 ,由于未见进一步的研究,尚不能认为色素痣中存在一种特异抗原。
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