...片段的长度,预计PCR产物的分子大小。通过与凝胶电泳后的DNA片段相比较,可初步判断PCR产物的特异性,然后将产物用限制性内切酶水解,进一步确定扩增产物的特异性。(二)分子杂交分析分子杂交既是检测PCR产物特异性的一种较好的方法,也是检测...
...cDNA文库,以得到cDNA克隆。(2)cDNA文库筛选法每种细胞中约15000个基因可以表达,但其含量从几个拷贝到20万拷贝不等,所以,就面临一个文库完整性的问题。可以下述3种方法使文库趋于完整:①用基因组DNA进行杂交选择;②用二次复性法;将...
...cDNA文库,以得到cDNA克隆。(2)cDNA文库筛选法每种细胞中约15000个基因可以表达,但其含量从几个拷贝到20万拷贝不等,所以,就面临一个文库完整性的问题。可以下述3种方法使文库趋于完整:①用基因组DNA进行杂交选择;②用二次复性法;将...
...试验顺序改变,2.3.1及2.3.2项过程重复一次。2.4 计算2.4.1 作图法用双对数纸,以凝结时间(秒)为纵坐标,稀释度(如25%、50%、100%……)为横坐标,分别将标准品和样品两套试验结果的平均凝结时间作两条平行线,从100%...
...正月一日、日未出、寅时,三月三日寅时,五月五日午时,七月七日丑时,九月九日寅时(一云丑时)。正月受一年用,三月受一春用,五月受一夏用,七月受一秋用,九月受一冬用。上年年常依此日受之法,不得饮酒食肉五辛芸台奶酪酥蜜,心如药王药上愿救护...
...DNA样品,经琼脂糖凝胶(Agarose)电泳,检查所提DNA的质量及降解情况。(二)组织DNA的制备(1)将200mg组织在冰浴条件下用消毒剪刀充分剪碎,加4ml 1×RSB缓冲液(10mmol/L Tris, pH7.4;10mmol/...
...步法不等。其中以二步法中的过碘酸钠法多用,戊二醛一步法反应率较低,较适用于交联AKP。免疫球蛋白标记辣根过氧化物酶(过碘酸钠法)与免疫球蛋白标记碱性磷酸脂酶(戊二醛一步法),按常规方法制备。抗IgG型抗体酶结合物也可用金黄色葡萄球菌A-蛋白酶...
...步法不等。其中以二步法中的过碘酸钠法多用,戊二醛一步法反应率较低,较适用于交联AKP。免疫球蛋白标记辣根过氧化物酶(过碘酸钠法)与免疫球蛋白标记碱性磷酸脂酶(戊二醛一步法),按常规方法制备。抗IgG型抗体酶结合物也可用金黄色葡萄球菌A-蛋白酶...
...抗联接胶体铁标记物的间接法染色,普鲁士蓝呈色观察。一步法所难检测到的抗原量为10-2~10-3μg,间接法 敏感性至少增加10倍(10-3~10-4μg)。2.免疫细胞化学染色法 步骤同下,方法敏感性同免疫金银法(IGSS),优点是背景干净...
...进行细胞膜受体的定位。(二)免疫标记方法金属类标记物的免疫标记法同切片免疫染色,即将标记物与抗体相结合,通过直接或间接法显示抗原部位。胶体金可与蛋白A相结合后与IgG分子中的Fc 段相结合。哪与卵白素(a-vidin)相结合可与结合抗体的...
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